临检基础小知识点整理（江大京江版For医学检验）.docVIP

血液部分 血液标本 全血：用于细胞计数、分类、形态观察; 血浆：全血去除血细胞，用于血栓止血检测; 血清：全血自然凝固后析出的液体，用于生物化学、免疫学检测等。 ? 血液标本采集方法： 一、毛细血管采血法：用于微量检测 ? ? ? ?部位：耳垂或手指末梢，主要是中指或无名指尖内侧，半岁以下拇指或足部，特殊人员视情况而定 ? ? ? ?所用器材：采血针、吸管 二、静脉采血法：用于血沉、免疫、生化等检测项目 ? ? ? ?部位：主要是肘静脉。还可以在：手背部手腕部等部位采血，幼儿可采用颈外静脉采血。 ? ? ? ?采血器材：一次性注射器，检验用真空定量采血装置。 ? 抗凝:? 用物理或化学方法除去或抑制血 液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固，称为抗凝。 一、草酸盐， 抗凝原理：与血液中钙离子形成沉淀； 使用方法：草酸钠0.1mol/L和血液1:9。 优点：溶解性好，价廉。 缺点：对凝血因子保护功能差，影响凝血因子；形成草酸钙沉淀物，影响自动凝血仪器的使用。 使用范围：逐步被淘汰。 二、柠檬酸钠（枸橼酸钠）， 抗凝原理：与钙离子生成可溶性的鳌合物。 使用方法：配成109mmol/L的浓度和血液1:9（用于凝血试验）；106mmol/L的浓度和血液1:4（用于血沉）。 优点：对凝血因子有很好的保护作用。 缺点：血液中溶解度低，抗凝作用较弱。 使用范围：止血学检验、血沉、输血保养液（毒性小）。 三、乙二胺四乙酸（EDTA）盐， 抗凝原理：与钙离子生成可溶性的鳌合物。 使用方法：15g/L EDTA和血液1:10。 优点：对红细胞和白细胞形态影响小。 缺点：影响血小板的聚集。 使用范围：全血细胞分析和血细胞比容测定，但不适用于出凝血实验和血小板功能。 四、肝素， 抗凝原理：加强抗凝血酶作用，阻止凝血酶形成。 使用方法：肝素钠1g/L与血液1:10。 优点：抗凝能力强、不影响血细胞体积、不易溶血、能耐高温。 缺点：引起白细胞聚集，使白细胞计数降低，不利于制备血涂片，价格昂贵。 使用范围：血浆生化/免疫项目，红细胞脆性实验，科学研究等。 ? 亚铁血红素:? 血红蛋白色素部分，由铁原子及原卟啉区组成。 ? 血涂片的制备 1、用途：??血细胞形态学检验、网织红、异常细胞检验、寄生虫检验。 2、制备步骤：（手工推片法） 将推玻片向1的方向稍抽回，当血液充满推玻片的宽度后，以一定均匀的速度向2的方向滑动。 3、质量评价：?均匀、厚薄、头体尾、边缘、两侧 注意：血滴大，速度快、角度大----血膜厚 ? 瑞氏染色法 原理：分两相进行，第一相是酸性伊红与细胞中的碱性物质如血红蛋白、嗜酸性颗粒结合；碱性染料天青B与细胞中的酸性物质如核染色质、特异中性颗粒、血小板结合。第二相是天青B和伊红结合在适宜条件下形成紫色的天青B-伊红复合物，结果使白细胞核染色质成紫色（疟原虫的染色质成红色），中性粒细胞的颗粒及血小板颗粒区成紫色。 试剂 1.? Wright染液：瑞氏染粉0.1g，甲醇60.0ml 甲醇：有强大的脱水力，可将细胞固定为一定形态，并使蛋白质沉淀为颗粒状、网状等结构，增加细胞与染料接触表面积，提高对染料的吸附作用，增强染色效果。 2.磷酸盐缓冲液（PBS）：磷酸二氢钾（无水）0.3g，磷酸氢二钠（无水）0.2g, 蒸馏水加到1000ml。配好后用磷酸盐溶液校正pH(6.4-6.8)，塞紧瓶口备用。 方法： a.? 用蜡笔在血膜两头划线，平放于染色架上。 b.? 加瑞氏染液覆盖血膜，固定1min。 c.? 滴加等量或稍多的缓冲液，混匀，染色5-10分钟。 d.? 用清水冲洗，待干后镜检。 ? 红细胞计数：测定单位体积血液中红细胞的数量 【技数方法】显微镜计数法： 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数后，滴入血细胞计数盘，然后于显微镜下，计数一定范围内的红细胞数，经过换算即可求得每升血液中的红细胞数。 【参考值】 成年男性：（4. 0 ～ 5. 5) ×10^12/L?成年女性：（3. 5 ～ 5. 0) ×10^12/L?新生儿：（6. 0 ～ 7. 0) ×10^12/L?低于3.5×10^12/L可诊断为贫血，低于1.5×10^12/L应考虑输血。 网织红细胞? 网织红细胞是未完全成熟的红细胞，是晚幼红细胞脱核后到完全成熟的红细胞之间的过渡型（未成熟）红细胞。 【计数方法】显微镜计数法：（活体染色） ? ? ? 染料 煌焦油兰：常用，染色效果好，但沉渣较多。 ? ? ? 新亚甲兰：WHO推荐的，染色效果好，但试剂昂贵。 试验方法 试管法：染色时间长（30min），效果好，易重复计数。 玻片法：染色时间短，水分易蒸发，结果偏低。 制薄片，不复染，油镜下计数1000个RBC中Ret数（缩小视野法或Miller窥盘）。 【参考值】成人：0.0