微生物检测样品处理方法.docxVIP

化妆品微生物检测样品的处理（摘至GB7918） 样品的采集1.1所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品，采样时可适当增加样品包装数量。1.2 供检验样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。1.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。1.4 若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品做细菌检验，再将剩余样品做其它分析。1.5 在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在符合生物安全要求的实验室中进行。供检样品的制备2.1 液体样品2.1.1 水溶性的液体样品，可量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中，混匀后，制成1：10检液。2.1.2 油性液体样品，取样品10g，先加5mL灭菌液体石蜡混匀，再加10mL 灭菌的吐温80，在40℃～44℃水浴中振荡混合10min，加入灭菌的生理盐水75mL（在40℃～44℃水浴中预温），在40℃～44℃水浴中乳化，制成1：10的悬液。2.2 膏、霜、乳剂半固体状样品5.2.1 亲水性的样品：称取10g，加到装有玻璃珠及90mL 灭菌生理盐水的三角瓶中，充分振荡混匀，静置15min。用其上清液作为1:10的检液。2.2.2 疏水性样品：称取10g，放到灭菌的研钵中，加10mL灭菌液体石蜡，研磨成粘稠状，再加入10mL灭菌吐温80，研磨待溶解后，加70mL灭菌生理盐水，在40℃～44℃水浴中充分混合，制成1：10检液。2.3 固体样品称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，使其分散混悬，静置后，取上清液作为1：10的检液。如有均质器，则采用无菌样品袋，将上述水溶性膏、霜、粉剂等，称10g样品加入90mL 灭菌生理盐水，均质1min～2min；疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称10g样品，加10mL 灭菌液体石蜡，10mL吐温80，70mL灭菌生理盐水，均质3min～5min。补充知识：石蜡：不溶于水、甘油、冷乙醇。溶于苯、乙醚、氯仿、二硫化碳、热乙醇。与除蓖麻油外大多数脂肪油能任意混合，樟脑、薄荷脑及大多数天然或人造麝香均能被溶解。吐温80：本品在水、乙醇、甲醇或醋酸乙酯中易溶，在矿物油中极微溶解。吐温80是一个亲水性的表面活性剂，具有很强的破裂细胞膜的作用而引起刺激性，溶血性和组胺释放（致敏性）。微生物繁殖速度：微生物一般20min繁殖一代，故微生物从稀释到倒平板不宜超过20min。食品微生物检测样品的处理（摘自GB4789）样品的稀释固体和半固体样品：称取25 g 样品置盛有 225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000 r/min ～10000 r/min均质1 min～2 min，或放入盛有225 mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min，制成1:10 的样品匀液。 液体样品：以无菌吸管吸取25 mL 样品置盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10 的样品匀液。1.3 用1 mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液1 mL，沿管壁缓慢注于盛有9 mL稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1 支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100 的样品匀液。2 样品的采集 2.1 采样原则 2.1.1 根据检验目的、食品特点、批量、检验方法、微生物的危害程度等确定采样方案。 2.1.2 应采用随机原则进行采样，确保所采集的样品具有代表性。 2.1.3 采样过程遵循无菌操作程序，防止一切可能的外来污染。 2.1.4 样品在保存和运输的过程中，应采取必要的措施防止样品中原有微生物的数量变化，保持样品的原有状态。 2.2 采样方案 2.2.1 类型 采样方案分为二级和三级采样方案。二级采样方案设有n 、c 和m值，三级采样方案设有n 、c 、m和M 值。 n ：同一批次产品应采集的样品件数； c ：最大可允许超出m值的样品数； m：微生物指标可接受水平的限量值； M： 微生物指标的最高安全限量值。 注1： 按照二级采样方案设定的指标，在n个样品中，允许有≤c 个样品其相应微生物指标检验值大于m值。GB 4789.1—2010 注2： 按照三级采样方案设定的指标，在n 个样品中，允许全部样品中相应微生物指标检验值小于或等于m 值；允许有≤c 个样品其相应微生物指标检验值在m 值和M