激肽类生物活性肽的毛细管电泳激光诱导荧光检测.pdf

激肽类生物活性肽的毛细管电泳激光诱导荧光检测 陈颖1’2，段建平2，徐两军2，陈红青2，陈国南¨ 摘要：以荧光素异硫氰酸盐柱前衍生了3种激肽类生物活性肽，较为详细地 研究了衍生反应条件以及毛细管电泳的分离条件，建立了毛细管电泳激光诱导 荧光法分离检测舒缓激肽、胰激肽、神经激肽A的方法。 关键词：荧光素异硫氰酸盐；毛细管电泳激光诱导荧光；舒缓激肽；胰激肽；神 经激肽A 近年来生物活性多肽的研究越来越引起科研 的种类，pH和浓度对衍生反应的影响。并优化了 工作者们的关注。生物活性多肽通常在人体体液 分离条件。在最优化条件下，3种激肽在10rain内 内的含量很低，它们参与调节人体的许多重要的 得以基线分离(见图1)。 生理学过程。舒缓激肽(BK)，胰激肽(Kal)和神经 激肽A(M诅)都属于激肽类生物活性肽。它们的药 理学作用包括增加毛细血管的渗透性，产生浮肿， 引发疼痛和伴随的反射n，2]。为了更好地了解这些 内源性生物活性多肽的生理效应和临床病理学， 建立灵敏的痕量内源性生物活性肽的分离检测是 十分必要的。 l实验部分 1．1仪器与试剂 图1 BK，gad和NKA的毛细管电泳图 Beckman MDQ毛细管电泳系统，32Karat色谱工作 1一BK2．6X10一。tool／L；2一Kal5．3×10一。moUL；3一NKA 站。分离毛细管为未涂层石英毛细管60cm(有效5．6X10—8I∞l，L 长度50∞)×75脚i．d．(河北永年光纤厂)。BK， Kal和NKA均购自sigma公司。 参考文献 Pharmacol 2结果与讨论 [1]RegoliD，BarabeJ．J Rev，1980，32：1 Bio- 以荧光素异硫氰酸盐为柱前衍生化试剂，详 [2]IIilgenfeldtU，IankeR，PdesterU甜面．Analytical 细考察了衍生化条件如衍生试剂的配比，衍生介质 chemisuy，1995，228：35 of withLIFdetection bradykinin-relatedpeplidesbycapinaryelectrophoresis Separation CHEN andCHEN and Fm91’2，DUANJian-pin91，XUZ切学蛔2，CHENHong-qin91 of 350002) ’ TestingCenter；2．DepartmentChemistry，Fuzhou with fluorescencewas for anddeter- laser-induced detection Abstract：C印mary developed8e13alation electrophoresis withfluo- of and werederivatized ruina