“血栓心脉宁片”抗血栓形成药效学研究报告.doc

研 究 报 告 课题名称：“血栓心脉宁片”抗血栓形成药效学研究 课题完成人：王放 张晓天 胡亚 王槐栋 王冀邯 课题完成时间：2011.06-2012.01 课题完成单位：吉林大学白求恩医学院 “血栓心脉宁片”抗血栓形成药效学研究 摘 要 目的： 研究血栓心脉宁片对急性血瘀模型大鼠血液流变学和改善体外血栓形成的影响及其对模型大鼠血浆血栓素A2(TXA2)、前列环素(PGI2)、一氧化氮(NO)、血管性血友病因子(vWF)、内皮素(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)及血小板α颗粒蛋白酶(GMP-140)含量的影响。 方法： Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、血栓心脉宁片低、中、高剂量组、步长脑心通胶囊阳性对照组。应用冰水-肾上腺素双刺激法建立大鼠急性血瘀模型，测定心脉宁片作用后模型大鼠血液流变学、体外血栓形成的影响及其对模型大鼠血浆血栓素A2(TXA2)、前列环素(PGI2)、一氧化氮(NO)、血管性血友病因子(vWF)、内皮素(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)及血小板α颗粒蛋白酶(GMP-140)含量的影响。 结果： 血栓心脉宁片高、中、低剂量组对急性血瘀大鼠全血黏度及血浆粘度均有明显的改善作用，且均有抑制其体外血栓形成的作用，以中剂量组效果最为明显，与步长脑心通胶囊具有相似的作用。血栓心脉宁低、中、高剂量组均可显著降低急性血瘀大鼠血浆TXA2、、GMP-140、vWF、ET-1及VEGF含量，而使血浆PGI2、NO含量明显升高，以中剂量组效果最为明显。 结论： 血栓心脉宁片具有改善急性血瘀大鼠血液流变学体外血栓形成的作用；血瘀大鼠血浆TXA2、、GMP-140、vWF、ET-1及VEGF含量增加血浆PGI2、NO含量 实验动物与材料 1. 动　物 Wistar大鼠60只，雌、雄各半，体重200g-220g，由吉林大学基础医学院试验动物中心提供，质量合格证号：SCXK-(吉)2009-0001。 2．实验药品与试剂 血栓心脉宁片，由吉林华康药业股份有限公司提供，国药准字产品批号：041101； 步长脑心通胶囊，陕西步长制药有限公司，国药准字Z2025001，产品批号：110764； 盐酸肾上腺素注射液，上海禾丰制药有限公司出品，批号：110302； 大鼠血栓素A2(TXA2)ELISA检测试剂盒，购自北京鼎国生物技术有限责任公司的RD Systems 分装试剂盒，批号； 大鼠前列环素(PGI2)ELISA检测试剂盒，购自北京鼎国生物技术有限责任公司的RD Systems 分装试剂盒，批号； 大鼠一氧化氮(NO)ELISA检测试剂盒，购自北京鼎国生物技术有限责任公司的RD Systems 分装试剂盒，批号； 大鼠内皮素(ET-1) ELISA试剂盒，购自北京鼎国生物技术有限责任公司的RD Systems 分装试剂盒，批号； 大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA检测试剂盒，购自北京鼎国生物技术有限责任公司的RD Systems 分装试剂盒，批号； 大鼠血管性血友病因子(vWF) ELISA 检测试剂盒，购自北京鼎国生物技术有限责任公司的RD Systems 分装试剂盒，批号； 大鼠血管内皮生长因子(VEGF) ELISA 检测试剂盒，购自北京鼎国生物技术有限责任公司的RD Systems 分装试剂盒，批号。 3. 仪 器 LT电子天平（深圳市力源检测仪器有限公司）；TDL80-2B飞鸽牌离心机（哈尔滨东联电子技术开发有限公司）；KES-900B型血流变检测仪（无锡康尔生仪器公司）；体外血栓形成仪（北京科临易检信息技术有限公司）；DHG-9053A型电热恒温干燥箱（上海医用恒温设备厂）；瑞士帝肯TECAN SUNRISE 酶标仪 研究方法 1. 动物分组与给药 取血栓心脉宁片，配成浓度为3.5%（g/v）、7.0%（g/v）、14.0%（g/v）高、中、低3个剂量的供试药液；步长脑心通胶囊，配成浓度为8.0%（g/v）的阳性对照药液；肾上腺素，配成浓度为0.1%的溶液；水合氯醛，配成浓度为10%的溶液。 自试验动物中心引入Wistar大鼠后，适应性饲养一周，室温22℃-25℃，湿度40%-60%。将大鼠按体重随机分为6组，每组10只，雌、雄各组均分，分组为：正常对照组、血瘀模型组、血栓心脉宁片高剂量组1.40 g/kg、中剂量组0.70 g/kg、低剂量组0.35 g/kg，步长脑心通颗粒阳性对照组0.80 g/kg。 试验过程中正常对照组正常饲养，血瘀模型组给水10 mL/kg，各给药组均给予10