西华师范大学微生物学课件宋波老师.ppt

A. D. Hershey和M. Chase， 1952年 以32S标记蛋白质外壳做噬菌体感染实验 （2）含35S-蛋白质的一组：放射性75%在上清液中 朊病毒的发现和思考 朊病毒含有微量的核酸，仍未发现？ 朊病毒仅由蛋白质构成 朊病毒的遗传物质为蛋白质？ 基因控制Pr因而控制性状 性质：质粒所含的基因对宿主细胞一般是非必需的 存在方式：游离态或附加体 重组：质粒转移时，它可以单独转移，也可以携带着染色体（片段）一起进行转移，所以它可成为基因工程的载体。 功能：进行细胞间接合并带有一些基因，如产生毒素、抗药性、降解功能等。 野生型：从自然界中分离到的没有发生任何突变的微生物。能在基本培养基中生长，如以A和B两个基因表示这两种物质的合成能力。遗传型A+B+ 突变型：野生型突变之后，丧失了合成某物质的能力。不能在基本培养基上生长，只能生长在完全培养基上，如以A和B两个基因表示其丧失这两种物质的合成能力。遗传型A-B- （一）接合（conjugation） 通过接合而获得新性状的受体细胞就是接合子conjugant 研究方法：1946年J.Lederberg等采用E.coli的两株营养缺陷型进行实验，为以后的微生物遗传学提供了必要的条件。 接合中断试验与染色体图： 接合中断试验：由Wollman和Jacob首创（1955），首先认识了原核微生物染色体的环状特性。 原理：接合试验的DNA转移过程存在着严格的顺序性，在接合进行中采用定时人为中断的方法，可以获得呈现不同数量 Hfr 性状的 F– 接合子，最后，根据F–中出现Hfr菌株中各种形状的时间顺序（分钟），可以绘出较为完整的环状染色体图（chromosome map）。 ②供体DNA片段（转化因子）大小适宜，分子量一般为1× 107 D 左右 ③菌株间的亲缘关系密切 4 转化的特点 自然转化的普遍性： 能发生转化作用的菌属主要有： 嗜血杆菌属、奈瑟氏球菌属、假单胞菌中多见。 在放线菌和蓝细菌以及粗糙脉胞菌和黑曲霉两个菌株之间能否发生转化，与它们在进化过程中的亲缘关系有着密切的关系。 三.转导（transduction） 定义：以温和噬菌体为媒介，将供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中，通过交换与整合，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象，称为转导。 获得新遗传性状的受体细胞，称转导子。 2.转导的种类 完全普遍转导 普遍转导 流产普遍转导 转导 低频转导 局限转导 高频转导 2.1 普遍性转导（generalized transduction） 定义：通过完全缺陷噬菌体对供体菌任何DNA小片段的“误包”而实现其遗传性状传递至受体菌的转导现象，称为普遍性转导。 1952年发现，在Salmonella typhimurium中存在转导现象。： 以其野生型菌株作为供体菌 营养缺陷型菌株作为受体菌 P22噬菌体作为转导媒介，对供体菌是烈性噬菌体，对受体菌是温和噬菌体 2.2 局限性转导 特点： 噬菌体对供体菌和受体菌都是温和噬菌体 只能转导供体菌的个别特定基因（一般为噬菌体整合位点两侧的基因） 缺陷噬菌体是由于其在形成过程中所发生的低频率（约10 – 5）“误切”，或由于双重溶源菌的裂解而形成（约形成50%缺陷噬菌体） 分类：低频转导与高频转导 低频转导（LFT，low frequency transduction） 在转导中，从宿主染色体上切离时发生不正常切离的频率极低，故这种裂解物中的部分缺陷噬菌体的比例是极低的（10 – 6）。 用LFT裂解物感染宿主，可获得极少量的局限转导子，即低频转导。 特点:诱导的一般都是溶源菌(供体菌) 高频转导（HFT，high frequency transduction） 特点:诱导的是双重溶源菌 λ与λdgal(含有供体菌gal基因的部分缺陷噬菌体)同时整合在一个受体菌的核染色体组上, 成为一个双重溶源菌（double lysogen）。 当被紫外线等诱导时,正常λ噬菌体的基因可补偿λdgal缺失的部分基因功能,两种噬菌体就同时获得复制的机会.所以在双重溶源菌中的正常λ噬菌体被称为助体（或辅助）噬菌体（helper phage） 双重溶源菌的裂解物中含有等量的λ