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实验十二、酵母菌子囊孢子观察
酵母菌子囊孢子的观察 目的要求 学习并掌握酵母菌子囊孢子的观察方法 基本原理 子囊孢子是子囊菌类真菌有性生殖产生的有性孢子。 在酵母菌中,能否形成子囊孢子及其形态是酵母菌分类鉴定的重要依据之一。 酵母菌形成子囊孢子需要一定条件,所以对不同属的酵母要选择适合形成子囊孢子的培养基。 麦氏培养基有利于酿酒酵母子囊孢子的形成。 子囊孢子形成过程 图1、S.cerevisiae(酿酒酵母)的生活史 ——引自周德庆《微生物学教程》 图2、Schizosaccaromyces octsporus(八孢裂殖酵母)的生活史 ——引自周德庆《微生物学教程》 图3、Saccharomycodes ludwiggi(路德类酵母)的生活史 ——引自周德庆《微生物学教程》 实验材料 菌种:酿酒酵母 培养基: 豆芽汁琼脂斜面 麦氏琼脂斜面 溶液或试剂: 5%的孔雀绿水溶液 0.5%的番红水溶液 95%的乙醇液。 仪器或其他用具: 载玻片 显微镜等。 实验方法 菌种活化 产孢培养 制片 染色 脱色 复染 镜检 实验结果 子囊孢子呈绿色 菌体呈粉红色 子囊呈粉红色 菌种活化 产孢培养 常规制片 染色、脱色 复 染 镜 检 水生态工程实验室-YJH 微生物学实验 细胞(+) 细胞(-) 管状突起 管状突起 接触、融合 质配 核配 减数分裂 4或8个子核 原生质结合 形成孢子壁 子囊孢子 酿酒酵母菌种 用接种环无菌 挑取少许菌种 25~28?C培养24hr 无菌操作接种在新鲜麦芽汁斜面 新鲜麦芽汁斜面 连续转接种3次 活化酵母菌种 用接种环无菌 挑取少许菌种 25~28?C培养1周 无菌接种在新鲜麦氏琼脂斜面上 麦氏琼脂斜面 生理盐水 1、滴生理盐水 滴半滴生理 盐水在载玻 片中央 挑取少量菌苔 与生理盐水混匀 均匀涂布 2、涂片 或电吹风吹干 3、干燥 室温自然晾干 5%孔雀绿染液 1、染色 滴加数滴孔 雀绿染液在 菌膜上 95%酒精脱色30s 95%酒精 2、脱色 0.5%番红水溶液 1、滴番红水溶液 滴加数滴番红染液在菌膜上 复染30s 2、水洗 不要直接冲菌膜 可从玻片反面冲洗 水生态工程实验室-YJH 微生物学实验
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