显微技术作业-课后作业A.doc

生物电子显微技术作业 课后作业A 上网有哪些信誉好的足球投注网站或查阅其他资料，列表简要说明你认为能用于生物形态、结构、功能观察研究的所有方法。以及这些方法的应用实例。 显微技术方法 应用实例 解剖显微镜 主要应用于在生物、医学领域广泛用于切片操作和显微外科手术 一、光学显微镜 复式显微镜 用于观察软木及其他植物组织 1、 偏光显微镜 用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种显微镜。凡具有双折射的物质，在偏光显微镜下就能分辨的清楚，当然这些物质也可用染色法来进行观察，但有些则不可能，而必须利用偏光显微镜。反射偏光显微镜是利用光的偏振特性对具有双折射性物质进行研究鉴定的必备仪器, 可用以做单偏光观察，正交偏光观察，锥光观察。 检术方式：1、正相镜检又称无畸变镜检，其特点是使用低倍物镜，不用伯特兰透镜（BertrandLens）,被研究对象可直接用偏振光研究。同时为使照明孔径变小，推开聚光镜的上透镜。正相镜检用于检查物体的双折射性。2、锥光镜检又称干涉镜检，研究在偏振光干涉时产生的干涉图样，这种方法用于观察物体的单轴或双轴性。在该方法中，用强会聚偏振光束照明。 2、暗视场显微镜 使用特殊的暗视场聚光镜使照明光线偏移而不进入物镜，只有样品的散射光进入物镜。因而在暗背景上得到亮的像，与暗视场照明相反，照明的光线直接到达成像平面的，称明视场照明。 　　暗视场显微镜主要用于观察结构和折射率变化有关的物体，如硅藻、放射虫类、细菌等具有规律结构的单细胞生物以及细胞中的线状结构，如鞭毛、纤维等。用暗视场显微镜还可观察到物镜分辨极限以下的质点，但不适用于观察染色的标本。 3、相差显微技术 正置相差显微镜 相差显微镜有暗相差和明相差之分。这种显微镜最大的特点是可以观察未经染色的标本和活细胞。 倒置相差显微镜 倒置相差显微镜，是相差显微镜和倒置显微镜的结合，即既具有倒置显微镜的倒置观察方式，同时，成像原理则与相差显微镜成像原理相一致。可以很方便地对培养中的细胞进行观察。且相差系统的观察效果远好于一般光学观察系统。如果安装了显微操作系统，则可以利用机械臂对细胞甚至染色体进行精细地操作，如核移植、基因导入、染色体显微切割等。 微分干涉差显微 能显示结构的三维立体投影影像。与相差显微镜相比，其标本可略厚一点，折射率差别更大，故影像的立体感更强。 使细胞的结构，特别是一些较大的细胞器，如核、线粒体等，立体感特别强，适合于显微操作。目前像基因注入、核移植、转基因等的显微操作常在这种显微镜下进行。 4、荧光显微技术 荧光显微镜 荧光显微镜是以紫外线为光源， 用以照射被检物体， 使之发出荧光， 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光。 全内反射荧光显微镜 全内角反射荧光显微镜，利用光线全反射后在介质另一面产生衰逝波的特性，激发荧光分子以观察荧光标定样品的极薄区域，观测的动态范围通常在200 nm以下。因为激发光呈指数衰减的特性，只有极靠近全反射面的样本区域会产生荧光反射，大大降低了背景光噪声干扰观测标的，故此项技术广泛应用于细胞表面物质的动态观察。 荧光显微CCD 荧光显微CCD 是与荧光显微镜密切相关的数码摄像产品，一方面它可以将荧光显微镜拍摄的显微摄影产品通过usb接口传输到电脑中，便于图像的采集研究，另一方面，通过荧光显微镜CCD我们可以拍摄到比单纯使用荧光显微镜更好的图片。荧光显微镜CCD可以连接荧光显微镜组成显微成像系统。 活体体内荧光成像系统 活体生物荧光成像技术是指在小的哺乳动物体内利用报告基因-荧光素酶基因表达所产生的荧光素酶蛋白与其小分子底物荧光素在氧、Mg2+离子存在的条件下消耗ATP发生氧化反应, 将部分化学能转变为可见光能释放。然后在体外利用敏感的CCD设备形成图像。荧光素酶基因可以被插入多种基因的启动子(promoter), 成为某种基因的报告基因, 通过监测报告基因从而实现对目标基因的监测。 5、聚焦显微镜 激光共焦扫描显微镜 （confocal laser scanning microscopy） 激光共聚焦扫描显微镜是用激光作扫描 光源，逐点、逐行、逐面快速扫描成像，扫描的 激光与荧光收集共用一个物镜，物镜的焦点 即扫描激光的聚焦点，也是瞬时成像的物点。 由于激光束的波长较短，光束很细，所以共焦 激光扫描显微镜有较