实验：细胞化学染色POX讲义.ppt

细胞外铁 （2）细胞内铁观察： 细胞内铁指有核红细胞胞质内出现蓝色颗粒，以油镜计100个中、晚幼红细胞，记录胞质中含有蓝色小颗粒（即铁粒红细胞）的比值。并根据细胞铁颗粒的数目、大小、染色深浅和颗粒分布情况，将铁粒幼红细胞分为如下四型： Ⅰ型：仅含1-2个铁颗粒。 Ⅱ型：含3-4个铁颗粒。 Ⅲ型：含6-9个以上铁颗粒。 Ⅳ型：10个铁颗粒。 正常范围：30% ~ 90% ，平均60%， 多见Ⅰ型，少见Ⅱ型，无Ⅲ、Ⅳ型。 细胞内铁 （3）环形铁粒幼红细胞： 指含铁颗粒6个，其中2/3以上铁颗粒围绕核周排列成完整环形或不完整环形。 正常或非铁粒幼细贫血无环形铁粒幼细胞，铁粒幼细贫血中环形铁粒幼细胞6% 。 环形铁粒幼细胞 【临床意义】 1．缺铁性贫血时， 骨髓细胞外铁明显减少，为“一”~“士”，细胞内铁平均5.9%，仅为I型。 经有效铁剂治疗后，外铁增多。 因此骨髓铁染色是诊断缺铁性贫血及指导铁剂治疗的重要方法。 2．铁粒幼细胞性贫血时， 外铁“2＋”一“3＋”，内铁平均70%，其铁粒粗大，以Ⅱ～ Ⅳ型为主，出现较多环形铁粒幼细胞。 因此，本实验是诊断铁粒幼细胞贫血的有效方法。 MDS也可出现环形铁粒幼细胞。 3. 非缺铁性贫血 如巨幼细胞贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等骨髓铁正常或不同程度的增加。 但再生障碍性贫血不会出现环形铁粒幼细胞，可作为与MDS鉴别的参考。 4. 继发性贫血的部分患者细胞内铁可减少，但细胞外铁不减少。 谢谢！ M1-SBB(+) M2-SBB(+) 三、过碘酸一雪夫（PAS)染色 【原理】 胞浆内存在糖原或多糖类物质（如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等）中的乙二醇基（CHOH-CHOH）经过碘酸（periodic acid）氧化，转变为二醛基（CHO-CHO），与雪夫(Schiff )试剂中的无色品红结合，形成紫红色染料而沉积于胞浆中。该反应称为过碘酸一雪夫(PAS)阳性反应。 【结果】 （1）粒细胞系： 原粒细胞多呈阴性反应，也可弱阳性。 自早幼粒细胞以后随着细胞的成熟程度，阳性反应逐渐增强。 嗜酸粒细胞颗粒本身不着色，但颗粒间的胞质呈弥漫性阳性反应； 嗜碱粒细胞为阳性反应，颗粒紫红色，大小不一。 中性粒细胞糖原含量参考标准 （-） 胞质无颗粒 （+） 胞质呈淡红色，无颗粒 （++） 胞质呈红色，有少量颗粒 （+++） 胞质呈暗红色 ，颗粒较密 （++++）胞质呈紫红色，颗粒极密 过碘酸-Schiff反应(PAS) （2）淋巴细胞系： 大多数淋巴细胞呈阴 性反应， 少数为（+）的阳性反应。 淋巴细胞糖原含量程度参考标准 （-） 胞质内无颗粒 （+） 胞质内有颗粒 （++） 有较粗红色颗粒 （+++） 有粗大红色颗粒 （++++） 颗粒粗大并有红色块状 （3）红细胞系： 幼红细胞和红细胞呈阴性反应 红细胞系列糖原含量程度参考标准 （-） 胞质无颗粒 （+） 有少数红色颗粒 （++） 有较粗红色颗粒或弥漫红色 （+++） 有粗大红色颗粒或深红色 （++++）有粗大红色块状或紫红色 （4）巨核细胞： 巨核细胞和血小板染色反应均为阳性 巨核细胞糖原含量程度参考标准 （-） 胞质无颗粒 （+） 少量糖原包涵体 （++） 中等量糖原包涵体，定位于核膜 出或分散胞质中，占胞质1/3 （+++）大量糖原包涵体分散于胞质的1/2 （++++）糖原包涵体充满整个胞质 PAS 巨核细胞 巨核细胞包涵体 （5）单核细胞呈阴性或阳性，颗粒细小，往往位于胞质边缘； 浆细胞大多呈阴性，少数为红色颗粒阳性； 组织细胞为阴性反应； 巨噬细胞可呈阳性，为红色颗粒反应。 【临床意义】 （1）M6与巨幼贫的鉴别 M6的幼红细胞PAS可呈强阳性，积分明显增高，巨贫、再障、溶贫时PAS反应为阴性。 （2）急性白血病的类型鉴别 ALL，PAS呈大块状阳性，也可是阴性，AML为阴性，急性单核细胞白血病时原单核细胞及幼单核细胞PAS阳性，积分增高，阳性颗粒小而多，呈弥散分布。 ALL-L1 L1 PAS(+) AML-M5 M5 PAS(+) AML-M6 AML-M6 PAS(+) AML-M7 M7 PAS(+) （3）