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色谱分析法Chromatography 定义为组分2的调整保留值与组分1的调整保留值之比；它是只与柱温及固定相的性质有关，而与柱经、柱长、填充情况及流动相流速无关，是一个很重要的色谱参数（也称为选择因子）。 小 结 色谱分析法的基本概念 色谱术语 色谱理论 定性和定量分析方法 预习GC和LC。 * 一、 概述 1、色谱法: 色谱法是一种重要的分离、分析技术，它是将待分析样品的各组分一一进行分离，然后顺序检测各组分的含量。 色谱柱： 固定相：固体、液体 流动相：液体、气体 1906年 俄国植物学家茨维特，研究植物叶的色素成分。 第一节 色谱分析法简介 色谱法的实质：分离； 色谱法的依据：各组分在互不相溶的两相——固定相与流动 相中吸附能力、分配系数或其它亲和作用性能的差异. 2. 色谱法的分类 (1)按流动相和固定相所处状态分类 气相色谱：气体作流动相 液相色谱：液体作流动相 超临界流体色谱: 气固色谱 气液色谱 液固色谱 液液色谱 (2)按固定相的固定方式分类 柱色谱法：固定相装在色谱柱中 纸色谱法：用滤纸上的水分子作固定相 薄层色谱法：将吸附剂粉末制成薄层作固定相 (3)按分离过程的机制分类 吸附色谱法：吸附剂表面对不同组分的物理吸附性能的差异 分配色谱法：不同组分在两相中有不同分配系数 离子交换色谱法：离子交换原理 排阻色谱法：多孔性物质对不同大小分子的排阻作用 色谱法分类总表 3. 色谱法的特点和应用 优点 a 高选择性: 如同位素、同系物、异构体等； b 高效能：多组分混合物的分离； c 高灵敏度：10-11 –10-13 g，适于作痕量分析，样品量极少，一般以微克计; d 分析速度快: 几分钟至几十分钟，同时测定多种组分 e 应用范围广: 气体、液体和固体物质。化学衍生色谱法几乎能分析所有的化学物质。 色谱法的缺点： 对未知物定性分析比较困难 已知纯物质色谱图相对照 发展高选择性的检测器： 色谱—质谱、色谱—红外光谱 二、 色谱分离原理 A、B二组分在色谱柱中的分离过程： 色谱柱 检测器 记录仪 色谱分离过程特点： 不同组分在通过色谱柱时移动速度不等，它提供了实现分离的可能性；各组分分子沿柱子扩散分布。 分配系数和分配比 a．分配系数K 平衡常数，一定的温度和压力下，组分在两相间达到分配平衡时，组分在固定相中的浓度Cs与在流动相中的浓度Cm之比 色谱分离的先决条件： 分配系数的有差异，分配系数相差越大，愈容易实现分离 b．分配比k’ 容量因子或容量比 一定温度和压力下，组分在两相间达到分配平衡时，固定相中的质量和流动相中的质量之比。 色谱图及常用术语 色谱流出曲线: 由检测器输出的电信号强度对时间作图，所得曲线 色谱峰: 曲线上突起部分 1、基线: 没有样品组分流出时的流出曲线； 2、峰高: 色谱峰顶点与基线之间的垂直距离； 3、区域宽度: 即色谱峰的宽度； 峰底宽度wb： 半峰宽w1/2： 标准偏差σ： 0.607倍峰高处峰宽的一半 。 Wb = 4 σ W1/2 = 2.354 σ t 峰面积A： 4、保留值 常用时间、距离或用将组分带出色谱柱所需要的流动相体积表示，保留值由色谱分离过程中的热力学因素所决定; 在一定色谱条件下保留值是特征的，可作为色谱定性的参数是色谱法的重要概念之一； a．保留时间 tR 从进样开始到色谱蜂最大值出现时所需要的时间；某组分的保留时间就是它通过色谱柱所需要的时间； 死时间tM：多用t0表示 不被固定相保留的组分,从进样到出现峰极大值的时间；死时间实际上就是流动相流经色谱柱所需要的时间； 调整保留时间： 反映了组分与固定相之间的作用，tM反映了柱内流动相所占体积大小，而与组分性质无关； 保留体积VR: 从进样开始到色谱峰最大值出现时所通过的流动相的体积 死体积VM 不被保留的组分通过色谱柱所消耗的流动相的体积 色谱柱中不被固定相占据的空间及色谱仪中管路和连接头间的空间以及检测器的空间的总和，等于死时间乘以载气的流速 调整保留体积VR’ 保留体积减去死体积: 5、相对保留值： 6、分配比：也就是容量因子 塔板理论 色谱柱—蒸馏塔，连续的色谱柱—由许多小段组成 每一小段内，固定相，流动相;组分在两相进行分