淡水生物调查规范.doc

宁波大学生命科学与生物工程学院 2000 年 7 月 一．浮游植物定量调查 （一）采样点的选择 由于水面大小、水深、水流等条件不同，不同水域的采集点选择也有差别，有条件时采样点可适当多设一些，一般情况下建议下列位置应设采样点：水库库心区、各湖区的中点、上游、下游、水库大坝附近及库（湖）湾等有代表的区域。 （二 ）采样层次、采水量及采样次数 ①凡水深不超过二米者，可于采样点水下0.5米处采水。②水深2-10米以内,应于距库底0.5米处另采一个水样。③水深超过10米时，应于中层处增采一个水样。深水湖泊、水库可根据具体情况确定采样层次。 采样次数可多可少，有条件时可逐月采样一次，一般情况可每季采样一次，最低限度应在春季和夏未秋初各采样一次。 每一采样点应采水1000毫升，如系一般性调查，可将各层所采水样等量混合，取1000毫升水样固定；或者分层采水分别计数后取平均值。分层采水可以了解每一采样点各层水中浮游植物的数量和种类。采得水样后应立即加入15毫升碘液（即鲁哥氏液）固定（鲁哥氏液配制方法：将6克碘化钾溶于20毫升水中，待其完全溶解后，加入4克碘充分摇动，待碘全溶解后加入80毫升水即可）。 采水器，各种采水器均可，但一定要能分层采水，一般 水深不超过10米可用1000毫升或1500的玻瓶采水器，水更深(如海洋)必须用颠倒采水器、北原式采水器或其它形式的采水器。 （三）沉淀与浓缩 以采水器采得水样后，须经浓缩沉淀方适于研究和保存。凡以碘液固定的水样瓶塞要拧紧，还要加入2-4%的甲醛固定液以利保存。定量水样应放入1000毫升分液漏斗中，静置24-36小时后，用内径为30毫米的橡皮乳胶管，接上橡皮球，利用虹吸法将沉淀上层清液缓慢吸出（切不可搅动底部，万一动了应重新静置沉淀 ），剩下30-50毫升沉淀物，倒入定量瓶中以备计数。为不使漂浮水面的某些微小生物等进入虹吸管内，管口应始终低于水面，虹吸时流速流量不可过大，吸至澄清液1/3时，应控制流速流量，使其成滴缓慢流下为宜。 采水时，每瓶上都应贴好标签，写明时间、地点、站号、样品号、水层、温度等内容，同时记录卡片以致备查。 计数 将浓缩沉淀后水样充分摇均后，吸出0.1毫升，置于0.1毫升计数框内（表面积最好20×20平方毫米）在400-600倍显微镜下观察计数，每瓶标本计数二片取其平均值，每片大约计算100个视野，但视野数可按浮游植物多少，而酌情增减；如果平均每个视野有十几个细胞，数50个视野就可以了；如果平均每个视野只有5-6个，就要数100个视野，如平均每个视野不超过1-2个时，要数200个视野以上，总之，每片计数的细胞总数应在1000-2000个以上，同一样品的二片计算结果和平均数之差如不大于其均数的15%，其均数视为有效结果，否则还必须测第三片，直至三片平均数与相近二数之差不超过均数的15%为止，这两个相近的值的均数，即可视为计数结果。 计数过程中常可碰到某些个体的一部分在视野中，而另一部在视野外，可规定在视野上半圈者计数，下半圈者不计数，此外，数量最好用细胞数表示，对不可用细胞数表示的群体或丝状体，可求出其平均细胞数。 计数时优势种类尽可能鉴别到种，其余鉴别到属。注意不要把微型浮游植物当作杂质而漏计。 其他要求： 校正计数框容积。 定量用的盖玻片应以碱水或肥皂水洗净备用，用前可浸于70%酒精中，用时取出以细绢拭干。 滴取样品以后最好用液体石腊封好计数框四周，以防计数过程中干燥。 以台微尺测所用显微镜一定倍数下的视野直径。 选取或自制好与计数框同样容积的吸管备用。 定量时应将浓缩标本水样充分摇匀，快吸快滴。 加上盖玻片后不应有气泡出现。 计数后的定量样品应保存下来。 一升水中的浮游植物的数量（N）可用下列公式计算： N= Cs/（ Fs×Fn） ×V / U ×Pn 式中： Cs---计数框面积（mm2 ） Fs---每个视野的面积 Fn---计数过的视野数 V---一升水样经沉淀浓缩后的体积（mL） U---计数框体积（mL ） Pn---每片计数出的浮游植物个数 如果计数的显微镜固定不变，Fn、V、U亦固定不变，公式中Cs/（ Fs×Fn） ×V / U用常数K代替，上述公式可简化为N=K×Pn 生物量的换算 因为浮游植物中不同种类的个体大小相差较悬殊，用个体数或细胞数都不能反映水体丰欠的真