半枝莲黄酮精要.pptx

结合半枝莲浅谈黄酮类化合物的提取、分离纯化和含量测定 刘勇 主要内容： 一、黄酮类化合物的简述 二、黄酮类化合物的提取 三、黄酮类化合物的分离和纯化 四、黄酮类化合物的含量测定 五、参考文献 一、黄酮类化合物的简述 黄酮类化合物是以2-苯基色原酮为基本母核的一类化合物，具有C6-C3-C6基本碳架的。天然黄酮类化合物分为黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮、二氢异黄酮、查耳酮、二氢查耳酮、花色素、黄烷醇、橙酮、双苯吡酮等。[1] 黄酮类化合物分布广泛，多存在于高等植物中，如唇形科、玄参科、蔷薇科、芸香科、菊科等。[2] 半枝莲为唇形科植物，含有的黄酮类成分大体分为黄酮，二氢黄酮和黄酮苷三种。目前从半枝莲中分离并确定结构的黄酮类成分有50种，其中黄酮占28种，二氢黄酮占6种，黄酮苷占16种。[3] 据文献报道，不同地区的半枝莲总黄酮平均含量为2.31%。[4] 黄酮类化合物具有抗氧化及清除自由基作用，抗癌、抗肿瘤作用，抗菌、抗病毒作用，抗衰老及DNA保护功能，抗心脑血管疾病的作用，调节内分泌系统的作用，抗炎、镇痛作用等。[5] 其中，具有抗癌作用的成分是我们课题研究的重点。 焦燕[6]对半枝莲分离纯化得到了野黄芩素、木樨草素、芹菜素和4-羟基汉黄芩素，并通过MTT活性实验，发现四种化合物对Hela细胞有一定的抑制作用。 二、黄酮类化合物的提取 主要提取方法： 1.溶剂提取 1.1水提取 1.2碱性水或碱性稀醇提取法 1.3有机溶剂提取 2.超声提取法 3.微波提取法 4.酶解法 5.半仿生提取方法 6.超临界流体萃取法 1.溶剂提取 1.1水提取 黄酮类化合物的水提取法是一种较传统的方法，主要用于黄酮苷类的提取。因提取率低, 提取物中杂质较多( 如无机盐、蛋白质、糖类等),后续分离麻烦, 现在很少单独使用该方法。 1.2碱性水或碱性稀醇提取法 黄酮类化合物大多具有酚羟基, 易溶于碱水, 酸化后又可沉淀析出。因此可用碱性水(碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钙水溶液) 或碱性稀醇(50%乙醇)浸出, 浸出液经酸化后析出黄酮类化合物。[7] 1.3有机溶剂提取 常用的有机溶剂有甲醇、乙醇等, 一般采取乙醇为提取溶剂。高浓度的乙醇(如90% -95%) 适于提取苷元, 浓度 60 % 左右的乙醇适于提取苷类。提取次数一般为 2-4 次, 提取方法有热回流提取和冷浸提取两种方式。 [8] 邸多隆等[9] 用正交实验法优选半枝莲提取工艺,以浸膏得率、总黄酮和野黄芩苷提取率为评价指标,选择乙醇浓度(%)、加醇量(倍)、提取时间(h)为考察因素,利用正交试验确定了醇提取半枝莲的最佳工艺条件为75%乙醇10倍量提取2.0h,共提取2次,平均乙醇浸膏得率为13.6%,总黄酮和野黄芩苷提取率分别为91.7%和78.4%。 2.超声提取法 原理是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出。 [10] 陈莉华等[11] 通过单因素和正交试验获得超声波辅助乙醇提取半枝莲黄酮的最佳工艺条件是乙醇体积分数为50%，料液比1:30( g/mL)，超声提取时间25min，浸泡温度65℃，此时黄酮的得率为3.0%。 3.微波提取法 原理是利用磁控管所产生的超高频率的快速震动, 使材料内分子间相互碰撞、挤压, 利于有效成分的浸出。[7] 薛梅等[12]从半枝莲运用微波技术提取半枝莲总黄酮,反应速度加快,提高了提取效率,测得半枝莲中总黄酮含量为3.74%。 4. 酶解法 原理是通过酶的作用裂解植物细胞壁, 使得植物次生代谢产物充分得到释放, 从而提高药用成分得率一种分离提取方法。[13] 庞允[14] 在研究银杏叶中黄酮的提取工艺时发现，酶解法同乙醇提取法相比,黄酮的提取率由1.29%提高为1.78%。 5. 半仿生提取方法