2013级复习：基因程课时12013级复习：基因工程课时1.ppt

* 限制酶的识别序列 回文序列 CT TCATGAATTCCGTACCCGGGCCTAA GAAGTACTTAAGGCATGGGCCCGGATT EcoRⅠ限制酶酶切位点 GGCATGGG AATTCCGTACCC 黏性末端 CTTCATG GAAGTACTTAA 平末端 SmaⅠ限制酶酶切位点 GGGCCTAA CCCGGATT 1）种类： 2）作用： E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 2、 DNA连接酶——“分子缝合针” （黏性末端） （黏性末端和平末端） 将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键 关于几种酶的归纳总结 名称 作用 参与生理过程及应用 ＤＮＡ连接酶 连接两个ＤＮＡ片段 基因工程 限制性核 酸内切酶 从特定位点（特异性的）切割某种特定的脱氧核苷酸序列 ＤＮＡ聚合酶 在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧核苷酸 ＤＮＡ复制 ＲＮＡ聚合酶 在核糖核苷酸链上添加单个核糖核苷酸 转录 解旋酶 使碱基间的氢键断裂形成单脱氧核苷酸链 ＤＮＡ复制及转录 逆转录酶 以ＲＮＡ为模板合成ＤＮＡ 逆转录，基因工程 深度拓展 知识延伸 基因的载体 质粒，噬菌体，动植物病毒等。 3、“分子运输车” 载体必须具备的条件： 载体的作用： 1）将外源基因转移到受体细胞中去。 2）在受体细胞内能稳定遗传和表达。 常用的载体有： 1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2）具一个或多个限制酶切割位点（以便与外源基 因连接） 3）具有某些标记基因（便于进行鉴定和选择）。 4）对受体细胞无害。 三、用转基因动物生产药物--动物乳腺生物反应器 获取目的基因 （药用蛋白基因） 构建基因表达载体 （在药用蛋白基因前加乳腺蛋白基因的启动子） 显微注射导入哺乳动物受精卵中 形成早期胚胎 将胚胎送入母体动物 发育成转基因动物（只有在产下的雌性动物个体中，转入的基因才能表达） 分析1、转基因植物的培育应用了转基因技术和植物组织培养技术 分析2、转基因动物的培育除了应用转基因技术，还可能用到体外受精技术、动物细胞培养技术、核移植技术、早期胚胎培养技术 1、基因工程的应用 （1）基因工程的实质：将一种生物的 转移到另一种生物体内，使后者产生本不能产生的 ，进而表现出新的 。 （2）基因工程的不足：在原则上只能生产自然界已存在的 。 2、天然蛋白质的不足 天然蛋白质是生物在长期 过程中形成的，它们的 符合特定物种 的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。 3、蛋白质工程的目的 生产符合人类生产和生活的需要的 。 四、蛋白质工程1、蛋白质工程崛起的缘由 基因 蛋白质 性状 蛋白质 进化 结构和功能 生存 蛋白质 2、蛋白质工程的基本原理 1、目标：根据人们对 功能的特定需求，对蛋白质的 进行分子设计。 2、原理：改造基因（基因 或基因 ） 。 3、实质 蛋白质 结构 修饰 合成 蛋白质工程的实质是对编码蛋白质 的基因进行改造 3、蛋白质工程流程图 从预期的蛋白质功能出发 设计预期的蛋白质结构 推测应有的氨基酸序列 找到相应的脱氧核苷酸序列(即基因) 板书：用干扰素例子，反推过程。 第4步后接着做什么？ 基因 DNA mRNA 氨基酸序列 多肽链 蛋白质 三维结构 转录 翻译 折叠 生物功能 预期功能 分子 设计 DNA合成 以中心法则为原理和线索 蛋白质工程 比较：基因工程和蛋白质工程 基因工程 蛋白质工程 相同点 都要改造基因，都属于分子水平 产生新的 基因型，无新基因 基因（型） 产生的蛋白质 原有的 可以是新的 联系 蛋白质工程是以基因工程为基础， 是基因工程的应用和延伸；前者可为后者修饰、改造酶 例1.下列叙述符合基因工程概念的是( ) A.B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干 扰素的菌株 C.用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 B 典例精练 例2.以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之