化学分析常用仪器.ppt.ppt

研究生实验技能培训－－化学分析常用仪器介绍 实验中心 谭炳炎 Waters 1525高效液相色谱仪 工作原理 储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内。 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。 仪器组成（主要技术参数） 1. 高压泵 恒压泵；恒流泵 2. 层析柱及其填充 进样器；柱管；层析柱的填充（干装法、半干 装法、浆装法） 3. 紫外光检测器 固定波长型；可变波长型；扫描型 储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪（柱温箱、二极管阵列检测器） 种类：分析型 制备型 基本概念和术语 色谱图和峰参数 色谱图 基线 噪音 漂移 色谱峰 拖尾因子 峰底 峰高 半峰宽 标准偏差 峰面积 峰面积 主要用途 有机化合物的定性定量分析，尤其是沸点较高和热稳定性较差的化合物，如染料农药、药物、生物碱、核酸、石油产品，高分子化合物及其中间体等。 也适合中药、功能食品等产品中有效成分含量特征分布图谱的建立。 广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。  高效液相色谱对于挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以及离子型化合物的分离尤为有利。 如氨基酸、多肽、蛋白质、生物碱、核酸、甾体、类脂、维生素、抗菌素等均可进行分离分析定量。 应用实例 复方解热镇痛片的分析 维生素类药物的分析 激素类药物的分离 生物碱的分析 核苷与核苷酸的分离鉴定 定性、定量分析 1.定性： 色谱鉴定法（纯物质对照法） 非色谱法定性（化学定性方法，两谱联 用法定性） 2.定量分析： 外标法；内标法；内加法；归一化法 高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。 液相色谱- 质谱连用技术受到普遍重视, 如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等。 液相色谱- 红外光谱连用也发展很快,如在环境污染分析测定水中的烃类, 海水中的不挥发烃类, 使环境污染分析得到新的发展。 实验须知 样品处理： 自备试剂： 结果分析： 常见故障 故障1 流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开purge键，清洗脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入流动相，无论打开purge 键几次，无法清除不断产生的气泡。 原因 过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内，过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。??? 处理办法 (1)过滤器浸泡于5 %硝酸溶液中，超声清洗几分钟即可。 (2) 如仍有气泡不断从过滤器冒出, 继续将过滤器浸泡于5 %硝酸溶液中。 (3)打开泄压阀，打开泵，流速调至1. 0～3. 0ml/ min ，纯水冲洗过滤器1 小时左右，即可将过滤器清洗干净。 (4)关闭泄压阀，纯甲醇冲洗半小时即可。 故障2??? 柱压高 原因 (1) 缓冲液盐分如(乙酸铵等) 沉积于柱内 (2) 样品污染沉积。??? 处理办法 (1) 对于第一种情况先用40～50 ℃的纯水，低速正向冲洗柱子，待柱压逐渐下降后，相应提高流速冲洗，柱压大幅度下降后，用常温纯水冲洗，之后用纯甲醇冲洗柱子30 分钟。 (2) 对于第二种情况，由样品的沉积引起污染的C18柱，和纯水反向冲洗柱子，然后换成甲醇冲洗，接着用甲醇+ 异丙醇(4 + 6) 冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定)，再用换成甲醇冲洗, 然后用纯水冲洗，最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30 分钟以上。 故障3?? 既无压力指示,又无液体流过 ??原因 (1) 泵密封垫圈磨损 (2) 大量气泡进入泵体。 处理办法 对于第一种情况,更换密封垫圈 对于第二种情况,在泵作用的同时, 用一个50ml 的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。 故障4??? 压力波动大,流量不稳定 ?原因 系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀 座之间夹有异物,使得两者不能密封。 处理办法 工作中注意观察流动相的量, 保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气。 如为单向阀和阀座之间夹有异物, 拆下单向阀, 放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗. 故障5?