MS联用仪器及应用.pptVIP

一、概述 generalization 二、GC-MS联用仪器 hyphenated technology of GC-MS GC-MS中的分子分离器 四极杆质量分析器（Quadrupole Mass Filter） 仪器结构 四极杆质量分离器 仪器与结构 飞行时间质量分析器 三、LC-MS联用仪器hyphenated technology of LC-MS （2）大气压化学电离（ APCI ） 大气压化学电离（ APCI ） 2.离子阱质量分析器 3. LC-MS (离子阱)联用仪器结构示意图 4. LC-MS (四极杆)联用仪器结构示意图 十、联用技术 a). LC/ESI-MS 十一、样品的制备 八、ESI 质谱图的解释 Formulae to Calculate Fragment Ion Masses [N] is the mass of N-terminal group, [C] is the mass of C-terminal group, [M] is mass of the sum of the neutral amino acid residue masses [C]+[M]-NH z (y+H)/2 y++ y-H2O y° y-NH3 y* [C]+[M]+H2 y [C]+[M]+CO x z-partial side chain w y-complete side chain v a-partial side chain d [N]+[M]+NH3 c (b+H)/2 b++ b-H2O b° b-NH3 b* [N]+[M] b (a+H)/2 a++ a-H2O a° a-NH3 a* [N]+[M]-CO a Ion Mass Ion Type 低能(Low Energy) CID特点: 反应发生在四极杆分析器和离子阱分析器； 质谱图中出现 N terminal 碎片离子：a, b or c 和有C terminal的碎片离子： x, y or z. 但主要是形成 a, b 和 y系列离子。 在碎裂过程中易丢失中性小分子NH3 和H2O， 分别形成 a*,b* 和 y* 和ao,bo 和yo。 高能(high Energy) CID特点: 反应发生在磁质谱分析器和飞行时间分析器； 质谱图中出现 N terminal 碎片离子：a, b or c 和有C terminal的碎片离子： x, y or z. 但主要是形成 a, b 和 y系列离子。 Post Source Decay特点： 质谱图类似高能CID谱。 3). CID分类 4) 电子捕获碎裂(Electron capture dissociation, ECD)反应在肽测序方面的应用 亮氨酸 异亮氨酸 1). 蛋白质分子量的测定－正离子质谱 ESI mass spectrum [M + nH]n+ n n +1 Mr: 平均分子量 Deconvoluted Mass Spectrum ２). 核苷酸分子量的测定－负离子质谱 质谱分析法－联用仪器及应用 * 质谱：纯物质结构分析 色谱：化合物分离 色谱-质谱联用：共同优点 GC-MS；LC-MS；CZE-MS （毛细管电泳-质谱） 困难点： 载气(或流动液)的分离； 出峰时间监测； 仪器小型化； 关键点：接口技术(分子分离器) Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer Separation Identification B A C D A D B C MS 分子分离器类型： 微孔玻璃式、半透膜式和喷射式三种。 喷射式分子分离器： 由一对同轴收缩型喷嘴构成，喷嘴被封在一真空室中，如图所示。可做成多级。 + Electron Beam A B C Sample in Ion Beam 色谱-四极杆质谱仪结构示意图 1. 大气压电离技术（API） （1）电喷雾电离（ API Electrospray） Rayleigh Limit Reached + + + + + + + + + + - - - - - + + + + + + + + + + - - - - - + + + + + + - - + + + + + + - - Evaporation + + Charged Droplets 试样离子 准分子离子 Analyte Ions Solv