抗体偶联药物讲述.ppt

* * 抗体偶联药物 目录 定义 原理 对Ag、Ab、连接子和药物分子的要求 抗体的突变 几种ADC定点偶联方法的比较 连接方式 ADC偶联比的测定方法 上市的药品 前景 挑战 一、什么是ADC 二、原理 药物分子 高毒性 靶点 分子量 溶解度 稳定性 三、对抗体、药物、连接子、靶标和抗原的要求 药物分子 高毒性 靶点 分子量 溶解度 稳定性 因为IgG有限的肿瘤穿透能力、低抗原表达性、内化效率不足和连接子代谢，均可能使细胞内的毒素浓度降低。通常为IC50：0.01-0.1nmol/L 药物分子 高毒性 靶点 分子量 溶解度 稳定性 必须位于细胞内,若ADC无法转运至细胞内将严重影响药物的有效性和毒性。在细胞外还可能影响，药物解离后可能对旁边的正常细胞有害。 药物分子 高毒性 靶点 分子量 溶解度 稳定性 药物的分子量较小，从而减少发生免疫原性的风险；抗体的分子量也要很小，IgG抗体的分子量约为150kD，毛细管内皮层和细胞外间隙难以透过如此巨大的抗体或偶联分子，抗体的分子量太小，会影响其在体内的半衰期。 药物分子 高毒性 靶点 分子量 溶解度 稳定性 应在水性缓冲溶液中具有适当的溶解度，以便于偶联抗体 药物分子 高毒性 靶点 分子量 溶解度 稳定性 负载应在血浆中具有充分的稳定性。 美登素类化合物 1 作用机制：通过抑制微管组装来抑制细胞的分裂 2 DM1临床研究发现：稳定、非裂解的硫醚键连接子（MCC)具有高效的疗效 毒素主要在细胞增殖过程中发挥作用，对其非分裂和静息的细胞没有作用 与分子的疏水性有关（连接子也是疏水性的：在血液或代谢器官（肝脏、肾脏）中意外释放游离型毒素可穿透细胞膜，并可能引起严重的副作用 耐药肿瘤细胞可能会限制ADC的活性（由药物转运蛋白表达或活性增加，加快疏水性化合物外排造成 作用微管的ADC药物的缺陷 目前开发带有负电荷α-磺酸基或极性短PEG的高度水溶性亲水性连接子，以增加溶解性 1 4 - Description of the sub contents 1.在血浆中稳定，避免细胞毒素提前释放损伤正常的组织或细胞 ption of the sub contents 2.当ADCs被内吞到靶细胞后，能够快速释放药物（非必须） - Description of the sub contents - Description of the sub contents 3.抗体的连接位点和连接位点的数量要明确且合适 - Description of the sub contents - Description of the sub contents 2 3 4.连接子的分子量和极性escription of the sub contents - Description of the sub contents 连接子 5、亲和素和生物素能否作为连接臂？ ③一定的内吞速率 ①抗原大量特异性的表达在靶细胞表面在正常组织或细胞表面不表达或少表达 ②抗原应尽量不分泌，因为分泌型抗原可与血液循环中抗体结合，从而导致与肿瘤细胞结合的抗体减少 ④有合适的内吞转运途径 要求 理想化的抗原 （四）理想化的抗体 ?靶向功能，能够有效地将细胞毒分子输送到靶细胞； ?具有较低的免疫原性。 ?具有合适的连接位点，偶联毒素后，不影响ADC的稳定性、亲和力、內吞及药效 ④与靶细胞表面的抗原结合后，能够诱导细胞进行内吞作用，进入胞内，最终进入溶酶体并导致细胞毒分子在胞内的有效释放；（内化-流式细胞术检测；细胞内化后定位检测-共聚焦显微镜）⑤保持裸抗体全部或部分功能，如细胞介导的抗体依赖性细胞毒作用（ADCC)、补体依赖性细胞毒作用(CDC)，即裸抗体也是有效的药物。 四、抗体的突变 缺点：偶联的药物分子数目不定、位置不定和各种产物在体内的药物代谢动力学、药效、安全性等问题。 方法：抗体进行诱导突变，现有报道在抗体的特定部位设计丙氨酸定点突变成半胱氨酸、引入非天然氨基酸、酶法和二硫键改造法等，可以获得固定偶联比的ADC。 五、几种ADC定点偶联的方法比较 连接方式 机制 缺点 改进 应用 SGN-75(抗CD70，Val-Cit-MMAF） 肽链接 血液的pH高于溶酶体内的pH，溶酶体内的蛋白水解酶在血液中的活性很低，ADC在胞内被蛋白水解酶水解，释放药物 药物直接连接到肽连接子上，会导致蛋白水解释放出细胞毒素药物的氨基酸加合物，会降低细胞毒活性 加入间隔基，常用是双功能性对氨基苄醇基团，他通过氨基与肽连接，形成酰胺键而含胺细胞毒性药物侧通过氨基甲酸酯官能团与连接子（PABC)的苄基羟基相连。 * *