保健食品功能学评价程序和检验方法的认识.doc

保健食品功能学评价程序和检验方法（1996年7月18日卫监发［1996］38号发布，自发布之日起实行1.主题内容和适用范围 ??? 本程序和检验方法规定了评价食品保健作用的统一程序和检验方法。 ??? 本程序和检验方法适用于评价食品的免疫调节、延缓衰老、改善记忆、促进生长发育、抗疲劳、减肥、耐缺氧、抗辐射、抗突变、抑制肿瘤、调节血脂、改善性功能等作用。 ??? 本程序和检验方法规定了评价食品保健作用的人体试食试验规程。 ??? 2.进行食品保健作用评价的基本要求 ??? 2.1对受试物的要求 ??? 2.1.1提供受试物的物理、化学性质（包括化学结构、纯度、稳定性等）等有关资料。 ??? 2.1.2受试物必须是规格化的产品，即符合既定的生产工艺、配方及质量标准。 ??? 2.1.3提供受试物安全性毒理学评价的资料，受试物必须是已经过食品安全性毒理学评价确认为安全的物质。 ??? 2.2对实验动物的要求 ??? 2.2.1根据各种试验的具体要求，合理选择实验动物。常用大鼠和小鼠，品系不限，推荐使用近交系动物。 ??? 2.2.2 动物的性别不限，可根据试验需要进行选择。动物的数量的要求为小鼠每组至少10只（单一性别），大鼠每组至少8只（单一性别）。动物的年龄可根据具体试验需要而定。 ??? 2.2.3 动物应达到二级实验动物的要求。 ??? 2.3 给受试物的剂量及时间 ??? 2.3.1 各种试验至少应设3个剂量组，1个对照组，必要时可设阳性对照组。剂量选择应合理，尽可能找出最低有效剂量。在3个剂量组中，其中一个剂量应相当于人推荐摄入量的5－10倍左右。 ??? 2.3.2 给受试物的时间应根据具体试验而定，原则上至少1个月。 ??? 3.试验项目、试验原则及结果判定 ??? 3.1 免疫调节作用 ??? 3.1.1 试验项目 ??? 3.1.1.1.1 脏器/体重比值 ??? 胸腺/体重比值 ?? ?脾脏/体重比值 ??? 3.1.1.1.2 细胞免疫功能测定 ??? 小鼠脾淋巴细胞转化实验 ??? 迟发型变态反应 ??? 3.1.1.1.3 体液免疫功能测定 ??? 抗体生成细胞检测 ??? 血清溶血素测定 ??? 3.1.1.1.4 单核－巨噬细胞功能测定 ??? 小鼠碳廓清试验 ??? 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验 ??? 3.1.1.1.5 N细胞活性测定 ??? 3.1.1.2 人体试食试验 ??? 3.1.1.2.1 细胞免疫功能测定 ??? 外周血淋巴细胞转化试验 ??? 3.1.1.2.2 体液免疫功能试验 ??? 单向免疫扩散法测定IgG、IgA、IgM ??? 3.1.1.2.3 非特异性免疫功能测定 ??? 吞噬与杀菌试验 ??? 3.1.1.2.4 N细胞活性测定 ??? 3.1.2 试验原则 ??? 要求选择一组能够全面反映免疫系统各方面功能的试验，其中细胞免疫、体液免疫、单核－巨噬细胞功能三个方面至少各选择1种试验，在确保安全的前提下尽可能进行人体试食试验。 ??? 3.1.3 结果判定 ??? 在一组试验中，受试物对免疫系统某方面的试验具有增强作用而对其他试验无抑制作用，可以判定该受试物具有该方面的免疫调节效应；对任何一项免疫试验具有抑制作用可判定该受试物具有免疫抑制效应。 ??? 在细胞免疫功能、体液免疫功能、单核－巨噬细胞功能及N细胞功能检测中，如有两个以上（含两个）功能检测结果阳性，即可判定该受试物具有免疫调节作用。 ??? 3.2 延缓衰老作用 ??? 3.2.1 试验项目 ??? 3.2.1.1 动物试验 ??? 3.2.1.1.1 生存试验 ??? 小鼠生存试验 ??? 大鼠生存试验 ??? 果蝇生存试验 ??? 3.2.1.1.2 过氧化脂质含量测定 ?? ?血（或组织）中过氧化脂质降解产物丙二醛（MDA）含量测定 ??? 组织中脂褐质含量测定 ??? 3.2.1.1.3 抗氧化酶活力测定 ??? 血（或组织）中超氧化物歧化酶（SOD）活力测定 ??? 血（或组织）中谷胱甘肽过氧化物酶（GS-PX）活力测定 ??? 3.2.1.2 人体试食试验 ??? 血中过氧化脂质降解产物丙二醛（MDA）含量测定 ??? 血中超氧化物歧化酶（SOD）活力测定 ??? 血中谷胱甘肽过氧化物酶（GS－PX）活力测定 ??? 3.2.2 试验原则 ??? 衰老机制比较复杂，迄今尚无一种公认的衰老机制学说，因而无单一、简便、实用的衰老指标可供应用，应采用尽可能多的试验方法，以保证试验结果的可信性。动物试验，除上述生存试验，过氧化脂质含量测定、抗氧化酶活力测定3个方面各选一项必做外，可能时应多选择一些指标（如脑、肝组织中单胺氧化酶（MAO-B）活力测定等）加以辅助。生存试验是最直观、最可靠的实验方法，