南京农大动物生物化学演示演示课件17.ppt

第17章 核酸技术Technology of Nucleic Acid 对遗传分子核酸的结构与功能的阐明，用于研究核酸的工具酶的开发，由核酸的分子杂交性质建立起的一系列分析技术，使我们已经能够按照自己的意愿来摆布和操作基因，去改变生命有机体的遗传性状，甚至制造出新的物种，以服务于人类。重组DNA技术使人类千百年的梦想变为了现实。 50年来，核酸酶学的进步为DNA的分析与鉴定提供了有力的工具。主要的核酸酶有： DNA聚合酶（DNA polymerase ） klenow 片段， Taq 酶 限制性核酸内切酶（restriction endonuclease ） 逆转录酶（Reverse transcriptase） S1核酸酶（ S1 nuclease） 连接酶（Ligase） 拓扑异构酶（Topoisomerase）等 限制性核酸内切酶—— 一把神奇的“手术刀” 具有内切和甲基化两种功能 能够识别外源的核酸并将它切除 有特异的识别位点，通常为4-8对碱基的旋转对称结构 在其切口处留下黏性末端（sticky end）——具有互补序列 的单股链，或者平头末端（blunt end） 有3种类型，II型为主 例如： EcoRI 利用一个标记的（如用同位素标记），特异的，单股DNA或RNA片段——探针（probe）， 可以： 研究DNA之间的亲缘关系； 发现基因的缺失或突变； 测定某种遗传信息的量； 鉴定某种基因 基因治疗等 分子杂交是一系列基因鉴定方法的基础 印迹技术（ Blotting） Southern blot——用探针鉴定DNA Northern blot——用探针鉴定RNA 原位杂交（Hybridization in situ） 指纹分析（Finger printing） 基因芯片（ DNA microarray） 在人类基因组项目基本完成之后，人类蛋白质组项目将要展开，旨在对人类基因组表达的全部蛋白质进行全面的、高通量的、精细的分析，这是后基因组时代的新的研究领域，对于人类认识自己，控制疾病的意义将难以估量。 * * Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 本章主要内容： ??? DNA重组技术 ?? 基因鉴定 核酸技术的应用 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 一个梦想已成真 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 生长激素基因注入小鼠受精卵中培育出了“硕鼠” Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 1.DNA重组技术 DNA重组技术是利用多种限制性内切酶和DNA连接酶等工具酶，以DNA为操作对象，在细胞外将一种外源DNA（来自原核或真核生物）和载体DNA重新组合连接（重组），形成重组DNA，然后将重组DNA转入宿主细胞（如大肠杆菌等），使外源基因DNA在宿主细胞中随宿主细胞的繁殖而增殖，并在宿主细胞中得到表达，最终获得基因表达产物或改变生物原有的遗传性状。“基因工程”（gene engineering）或“分子克隆”（molecular cloning）。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright