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一 肿瘤相关基因1、从分子生物学的角度，恶性肿瘤可视为基因的疾病。某些染色体上的损伤致使基因突变的结果，导致细胞的过度生长、缺乏分化而异常增生，并可侵犯正常组织和器官，最终可以扩散到全身。肿瘤的发生多因素,多基因,多阶段,多途径。2、直接致癌物指直接暴露于细胞和机体便可致癌的因素或分子。3、前致癌物指需经代谢转化方具有致癌活性因素或分子4、癌基因：是指细胞内或病毒内存在的能促进细胞生长和分化的基因它的结构异常或表达异常可引起细胞癌变。细胞癌基因激活的方式（点突变、基因易位、基因扩增、启动子的插入、去甲基化）5、恶性肿瘤中则是糖酵解抑制有氧氧化，Warburg称为效应。肿瘤无论在有氧、无氧的条件下均表现为糖酵解活跃，因此与之相关的酶活性均增强。6、肿瘤细胞膜发生的改变：细胞膜通透性增强是肿瘤的特征；植物凝集素引起的凝集性增加使肿瘤细胞表现接触抑制；细胞膜粘附性降低有利于癌的侵袭和转移；膜表面负电荷增加；糖蛋白中的糖链改变是肿瘤常见的变化；膜糖脂组成发生变化；恶性转化细胞膜上存在肿瘤纤溶酶。7、肿瘤侵袭和转移的三个过程：肿瘤细胞与细胞外基质的粘附、结合。肿瘤细胞外基质的蛋白水解酶的降解。肿瘤细胞转移至被水解的基质区进一步生长、扩散。二基因诊断与基因治疗1、基因诊断：利用分子生物学技术，通过检测基因及基因表达产物的存在状态，对疾病作出诊断的方法。基因诊断检测的目标分子是DNA、RNA，也可以是蛋白质或者多肽。2、southernblotting：即将待测DNA酶切、电泳、转移（印）并固定在固相支持物上，用已知DNA探针进行检测的方法。提取DNA→限制性内切酶消化DNA,以产生特定长度的片段→凝胶电泳分离→变性处理→DNA转印到膜上并使其牢固结合→将标记的探针与膜上DNA片段杂交分析杂交信号。4、northernblotting：RNA经变性琼脂糖凝胶电泳后，转移到固相支持物上，通过分子杂交检测特定的RNA分子的含量与大小。14)?Southern?blot：DNA印迹杂交，指利用具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性，综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果，便可绘制出DNA分子的限制图谱，此即DNA印迹杂交。?Northern?blot：RNA印迹杂交，首先通过电泳的方法将不同的RNA分子依据其分子量大小加以区分，然后通过与特定基因互补配对的探针杂交来检测目的片段。?Western?blot：蛋白质印迹。通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。5、原位杂交：是指将特定标记的已知顺序核酸探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸序列进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。6、荧光原位杂交：是原位杂交技术大家族中的一员，因其所用探针被荧光物质标记（间接或直接）而得名；基本原理用荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火温度下复性；通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象（即维持其原位）的前提下对靶核酸进行分析。7、聚合酶链式反应（PCR）:是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA的短时间内大幅增加。8、反转录病毒前病毒的结构特点：两端各有一长末端重复序列LTR，LTR由U3、R和U5三部分组成,U3在内有增强子和启动子,U3和U5两端分别有病毒整合序列,?在R内还有ployA加尾信号。病毒具有3个结构基因，9、广义的基因治疗：①外源正常基因导入病变细胞，产生正常基因的表达产物以补充缺失的或失去正常功能的蛋白质；②采用适当的技术抑制细胞内过度表达的基因；③将特定的基因导入非病变细胞，在体内表达特定产物；④向功能异常的细胞（肿瘤细胞）中导入该细胞中本来不存在的基因（如自杀基因），利用这些基因的表达产物达到治疗疾病的目的。三、分子生物学技术1、核酸分子杂交技术：是在DNA变性和复性的基础上建立起来的一种分子生物学技术. 其原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下根据碱基互补的原则可以形成双链(碱基对之间非共价健形成稳定的双链).2、核酸探针：是指用放射性核素、生物素或其他活性物质标记而便于检测的，能与特定的核酸序列发生特异性互补的已知DNA或RNA片段。3、人工合成的寡核酸探针有下述优点：①短的探针比长探针杂交速度快、穿透力强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针，避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性，提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段，在严格的杂交条件下，可用于检测