第二章提取分离和鉴定的方法2分解.ppt

常用的极性吸附剂：硅胶、氧化铝。 硅胶显微酸性，适于分离酸性和中性化合物，分离生物碱时需在流动相中加入适量的有机碱； 氧化铝呈碱性，适于分离生物碱等碱性成分，不宜用于分离有机酸、酚性等酸性成分。 1．物质的吸附规律 2.3 物质的吸附性差别 硅胶、氧化铝均为极性吸附剂，故有以下特点： ①被分离物质极性越强，吸附力越强。强极性溶质将优先被吸附。 ②溶剂极性越弱，则吸附剂对溶质的吸附能力越强。随溶剂极性的增强，则吸附剂对溶质的吸附力将减弱。 ③当加入极性较强的溶剂后，先前被硅胶或氧化铝所吸附的溶质可被置换而洗脱出来。 1．物质的吸附规律 2.3 物质的吸附性差别 2．极性及其强弱判断 （1）一般化合物的极性按下列官能团的顺序增强： —CH2—CH2—，—CH2=CH2—，—OCH3，—COOR，C=O，—CHO，—NH2，—OH，—COOH （2）溶剂的极性可大体根据介电常数的大小来判断。介电常数越大，则极性越大。一般溶剂的介电常数按下列顺序增大： 环己烷（1.88），苯（2.29），无水乙醚（4.47），氯仿（5.20），乙酸乙酯（6.11），乙醇（26.0），甲醇（31.2），水（81.0） 2.3 物质的吸附性差别 3．吸附柱色谱法用于物质的分离 以硅胶或氧化铝为吸附剂进行柱色谱分离时： （1）尽可能选用极性小的溶剂装柱和溶解样品，或用极性稍大的溶剂溶解样品后，以少量吸附剂拌匀挥干，上柱。 （2）一般以TLC展开时使组分Rf值达到0.2~0.3的溶剂系统作为最佳溶剂系统进行洗脱。实践中多用混合的有机溶剂系统。 2.3 物质的吸附性差别 2.3 物质的吸附性差别 3．吸附柱色谱法用于物质的分离 （3）为避免化学吸附，酸性物质宜用硅胶、碱性物质宜用氧化铝作为吸附剂进行分离。通常在分离酸性（或碱性）物质时，洗脱溶剂中常加入适量的醋酸（或氨、吡啶、二乙胺），以防止拖尾、使斑点集中。 2.3 物质的吸附性差别 4 ．聚酰胺吸附色谱法 （1）原理：氢键吸附。 一般认为系通过分子中的酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物的酚羟基，或酰胺键上的游离胺基与醌类、脂肪酸上的羰基形成氢键缔合而产生吸附。吸附强弱取决于各种化合物与之形成氢键缔合的能力。 2.3 物质的吸附性差别 （2）吸附能力的强弱 通常化合物在水溶剂中大致有以下规律： ①形成氢键的基团数目越多，则能力越强。 ②成键位置对吸附能力也有影响。易形成分子内氢键者，其在聚酰胺上的吸附响应减弱。 4 ．聚酰胺吸附色谱法 2.3 物质的吸附性差别 ③分子中芳香化程度高，则吸附性增强；反之，则减弱。 一般情况下，各种溶剂在聚酰胺柱上的洗脱能力由弱致强的大致顺序如下： 水—甲醇—乙醇—氢氧化钠水溶液—甲酰胺—二甲基甲酰胺—尿素水溶液 其中，最常应用的洗脱系统是：乙醇—水 4 ．聚酰胺吸附色谱法 2.3 物质的吸附性差别 4 ．聚酰胺吸附色谱法 （3）应用： ①特别适合于酚类、黄酮类化合物的制备和分离。 ②脱鞣质处理 ③ 对生物碱、萜类、甾类、糖类、氨基酸等其他极性与非极性化合物的分离也有着广泛的用途。 2.3 物质的吸附性差别 5 ．大孔吸附树脂 通常分为极性和非极性两类。 （1）原理： 吸附性和分子筛性相结合。吸附性是由范德华引力或氢键引起的。分子筛是由于其本身多孔性结构产生的。 2.3 物质的吸附性差别 5 ．大孔吸附树脂 （2）影响因素： ①一般非极性化合物在水中易被非极性树脂吸附，极性化合物在水中易被极性树脂吸附。糖是极性水溶性化合物，与D型非极性树脂吸附作用很弱。 ②物质在溶剂中的溶解度大，树脂对此物质的吸附力就小，反之就大。 2.3 物质的吸附性差别 5 ．大孔吸附树脂 （3）应用：广泛应用于化合物的分离与富集工作中。如：苷类与 糖类的 分离，生物碱的精制，多糖、黄酮、三萜类化合物的分离等。 （4）洗脱液的选择：洗脱液可使用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。最常用的是乙醇—水。 2.3 物质的吸附性差别 2.4 物质分子大小 1．凝胶过滤法 （1）原理：分子筛原理。即利用凝胶的三维网状结构的分子筛的过滤作用将化合物按分子量大小不同进行分离。 （2）出柱顺序：按分子由大到小顺序先后流出并得到分离。 （3）常用的溶剂： ①碱性水溶液（0.1mol/L NH4OH）含盐水溶液（0.5mol/L NaCl等） ②醇及含水醇，如甲醇、甲醇—水 ③其他溶剂：如含水丙酮，甲醇-氯仿 1．凝胶过滤法 （4）凝胶的种类与性质：种类很多，常用的有以下两种： ① Sephadex-G：只适用于水中应用，且不同规格适合分离不同分子量的物质。 ② Sephadex LH-20：为Sephadex G-25经