第22章节免疫诊断[NXPowerLìte].ppt

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第22章节免疫诊断[NXPowerLìte]

第22章 免疫诊断 第一节 抗原或抗体的检测 一、抗原抗体反应的原理 抗原抗体的结合实质 : 抗原表位与抗体超变区中抗原结合点之 间的结合。由于两者在化学结构和空间构型 上呈互补关系,所以抗原与抗体的结合具有 高度的特异性。这种特异性如同钥匙和锁的 关系。 一、抗原抗体反应的原理 (一)抗原抗体反应的特异性 一种抗原一般只能与由它刺激所产生的抗体结合。 抗原抗体结合力的大小表示: 亲和力:抗体分子单一抗原结合部位与一个相 应抗原表位间互补结合的强度。 一、抗原抗体反应的原理 (一)抗原抗体反应的特异性 影响抗原抗体结合的因素: 抗原抗体空间构象的互补程度 温度 酸碱度 离子强度 一、抗原抗体反应的原理 (二)抗原抗体反应的可见性 二、抗原或抗体的检测方法 (一)凝集反应 细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集团快。 1. 直接凝集 玻片凝集试验 试管凝集试验 2.间接凝集 二、抗原或抗体的检测方法 (二)沉淀反应 可溶性抗原与相应抗体结合后出现沉淀物. 1.单向免疫扩散 2.双向免疫扩散 3.免疫电泳 4.免疫比浊 二、抗原或抗体的检测方法 (三)补体参与的反应 1.补体结合试验 2.溶血空斑试验 (四)用抗体或抗原标记的抗原抗体反应 1.免疫荧光法 直接荧光法 间接荧光法 二、抗原或抗体的检测方法 (四)用抗体或抗原标记的抗原抗体反应 双抗体夹心法 间接法 2.酶免疫测定 BAS-ELISA 酶联免疫斑点试验 免疫组化技术 二、抗原或抗体的检测方法 (四)用抗体或抗原标记的抗原抗体反应 3.放射免疫测定法 4.化学发光免疫分析 5.免疫印迹法 6.免疫PCR 第二节 免疫细胞的测定 一.淋巴细胞的分离与类型鉴定 1.免疫荧光法 2.磁珠分离法 3.淘选法 4.流式细胞术 5.抗原肽-MHC分子四聚体技术(p236) 第二节 免疫细胞的测定 二.白细胞功能测定 (一)T细胞功能测定 1.T细胞增殖试验 3H-TdR掺入法 MTT法(p237) 2.细胞毒试验 51Cr释放法 乳酸脱氢酶释放法 凋亡细胞检查法 第二节 免疫细胞的测定 二.白细胞功能测定 (一)T细胞功能测定 3.细胞因子检测 免疫学检测法 生物活性测定法 PCR 4.皮肤试验 第二节 免疫细胞的测定 二.白细胞功能测定 (二)B细胞功能测定 1.B细胞增殖试验 2.抗体形成细胞试验 第二节 免疫细胞的测定 二.白细胞功能测定 (二)吞噬细胞功能测定 1.趋化功能测定 Boyden小室法 琼脂糖凝胶法 过氧化物酶测定法 2.吞噬功能测定 NBT试验 荧光标记物试验 第三节 免疫学检测方法的应用 一.免疫学检测方法的评估与选择 特异性=真阴性/(真阴性+假阳性)×100% 敏感性=真阳性/(真阳性+假阴性)×100% 第三节 免疫学检测方法的应用 二.疾病的诊断 1. 感染性疾病 2. 免疫缺陷病 3. 自身免疫

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