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间接凝集抑制试验 待测抗原 已知抗体 特异结合 抗原抗体复合物 NS + 致敏颗粒 无凝集颗粒 阳性 间接凝集抑制试验 待测抗原 已知抗体 无结合 抗原抗体分散 NS + 致敏颗粒 有凝集颗粒 阴性 SPA:SPA-IgG Fc; SPA抗体致敏------测抗原 协同凝集试验 原理图 IgG SPA SPA- IgG 待测抗原 SPA- IgG-待测抗原凝集颗粒 混合 加入 间接凝集反应的应用 抗原的检测 反向间接凝集试验可用于检测病原体的可溶性抗原,也可用于检测各种蛋白质成分。 抗体的检测 检测细菌、病毒、寄生虫等感染后产生的抗体。 抗球蛋白试验又称 Coombs试验 第三节 抗球蛋白试验 (一)直接Coombs试验 不完全抗体 检测红细胞上抗体 (二)间接Coombs试验 检测血清中的抗红细胞抗体 临床应用: 在输血上的应用 血型抗原抗体的检查 对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断 对溶血性贫血的研究 对细菌或立克次体的不完全抗体检查 * * * * * 第十三章 凝集反应 制作人:和燕 早在1896年,Widal就利用伤寒病人的血清与伤寒杆菌发生特异性凝集的现象,有效地诊断伤寒病。--肥达试验 至1903年,Landsteiner在特异性血凝现象的基础上发现了人类ABO血型,并于1930年获得了诺贝尔医学奖。 --血型鉴定 凝集反应的发现 凝集反应的定义 凝集反应: 颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体特异性结合,或可溶性抗原(或抗体)与载体颗粒结合成致敏颗粒(红细胞、聚苯乙烯乳胶颗粒、炭粒)后,它们与相应抗体(或抗原)发生特异性反应,在适当电解质存在下,形成肉眼可见的凝集现象。 可见反应形成 阴性? 阳性? 凝集反应的分型 凝集反应 直接凝集反应 间接凝集反应 抗球蛋白试验 第一节 直接凝集反应 直接凝集反应: 颗粒性抗原直接与抗体结合,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象。 凝集原(agglutinogen):凝集反应中的抗原。 凝集素(agglutinin):凝集参与反应的抗体 (一)玻片凝集试验 方法评价: 定性试验 简便和快速 敏感度低 应用: 菌种鉴定 血清学分型 血型鉴定 在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象。 (二)试管凝集试验 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 弃掉0.5 试管凝集试验原理 结果 1 2 3 4 5 6 7 菌液 结果 + 很小的凝集颗粒 混浊 - 无凝集现象 与对照相同 ++ 小、部分凝集块 中等混浊 +++ 大多凝集管底 轻度混浊 ++++ 大的凝集块 清亮 凝集程度 沉淀 上清 管底沉淀 凝集程度 方法评价: 半定量试验 简便、快速 敏感度低 可有假阳性 临床应用: 肥达试验 外斐试验 交叉配血试验 第二节 间接凝集反应 间接凝集反应: 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面,然后与相应的抗体或抗原反应,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象. 载体 可溶性抗原 致敏 致敏颗粒 NS 凝集颗粒 间接凝集试验示意图 常用载体 红细胞--间接血凝试验 聚苯乙烯乳胶--胶乳凝集试验 1、正向间接凝集试验 2、反向间接凝集试验 3、间接凝集抑制试验 4、协同凝集试验 间接凝集反应的类型 用抗原致敏载体--检测抗体 正向间接凝集试验 反向间接凝集试验 用抗体致敏载体----检测抗原 间接凝集抑制试验 用抗原致敏载体--检测抗原 * * * * *
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