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细胞的结构与功能 (一) 液 泡(central vacuole) 自溶现象:当植物细胞分化、衰老或受到伤害时,溶酶体膜或液泡膜破裂,释放、活化种种水解酶,使细胞分解的现象叫自溶现象。 第三节 原生质的性质 一、原生质的组成成分 二、原生质是一个多相复杂胶体系统 三、原生质胶体状态与生命活动的关系 一、原生质的组成成分 蛋白质10%~20% 水75%~95% 核酸、脂、糖、 各种矿质10%~20% 二、原生质是一个多相复杂胶体系统 胶体 两相 胶粒半径在0.001~0.1μm 连续相(介质) 分散相(胶粒) 为什么说原生质是一个多相稳定亲水胶体? 1、原生质中含大量水,水为连续相,原生质所含蛋白质、核酸等为分散相; 2、蛋白质分子直径在0.01~0.25μm ,符合胶体要求; 3、胶粒成份多样。 4、 原生质胶体的稳定性 。 ① 水化膜 ② 两电层 ③ 胶体保护作用:亲水胶体与疏水胶体相混合时,亲水胶体对疏水胶体产生保护作用叫~ 三、原生质胶体状态与生命活动的关系 凝胶: 溶胶: 溶胶:胶粒各自分开,胶体能流动叫溶胶。 溶胶 凝胶 凝胶:胶粒相互连接成链,再互相交织成网状,水分子处在网眼里,但胶体不能流动,叫~。 溶、凝胶可以互相转化 凝胶作用:溶胶转变成凝胶叫凝胶作用。 溶胶作用:凝胶转变成溶胶叫溶胶作用 原生质通过溶凝胶相互转化来调节植物细胞生命活动 原生质处在溶胶状态,代谢活跃,生命活动旺盛,但抗性较弱。 原生质处在凝胶状态,生命活动弱,但凝胶胶粒交织成网状,强度较大,水在网眼中,也不易丢失,抗性增加。 原生质溶、凝胶的转变是植物适应环境的表现 为什么倒春寒时农作物易受害? 第四节 生物膜 一、生物膜的概念 二、生物膜化学组成 三、生物膜的结构 四、生物膜的分别透性 五、生物膜的功能 一、生物膜的概念 生物膜:构成细胞的所有膜的总称。 质膜(cell membrane) :指包围在细胞最外面一层膜叫质膜。 内膜系统(endomembrane):处于细胞质中构成各种细胞器的膜称内膜系统。 二、生物膜化学组成 脂 类: 25%~ 40% 蛋白质: 60%~ 65% 糖: 5% 第一节 细胞生理学的研究方法 第二节 细胞的结构与功能 第三节 原生质的性质 第四节 生物膜 第五节 细胞全能性 第一节 细胞生理学的研究方法 一、细胞化学方法 二、分级分离法 三、免疫化学法 一、细胞化学方法 定义:利用细胞内物质对某一染料的特殊颜色反应或对某一底物专一性反应而进行的方法。 用途: ①鉴定细胞存在有哪些物质。 如将植物材料切片用福尔裉(ken)染色(红色,测DNA,该染料将DNA的水解产物d-核糖反应形成蓝紫色产物,在显微镜下观察切片,看蓝紫色出现的部位或范围。 一、细胞化学方法 用途: 一、细胞化学方法 ②鉴定某种酶或某一特殊反应在细胞哪部位进行(称酶的细胞化学)。 如淀粉磷酸化酶催化淀粉转化为1-磷酸葡萄糖或逆反应,淀粉遇碘变蓝,将新鲜马铃薯切片与1-磷酸葡萄糖及其他缓冲液一起保温,用KI-I2处理切片,变蓝外即为酶所在之处。 缺点: 一、细胞化学方法 保持细胞中酶活性与保持细胞结构完整性有矛盾。因为要保持细胞完整,必须进行固定,而固定剂往往会破坏酶或抑制酶活性。因此研究细胞生理学最好是细胞化学法与细胞分级分离法配合。用化学法定位,用分级分离法分析酶活性。 二、分级分离法 定义:利用不同离心力条件,将细胞各部分分开。 原理:F=mv2/2r F:离心力 m:质量 V:转速 r:转轴半径 二、分级分离法 步骤: 细胞匀浆 离心 生化分析 离心:g(高速条件下用,表示离心力比重力大多少倍) rpm(低速条件用,表示每分钟转速) 二、分级分离法 注意事项: 细胞匀浆必须在以下条件; a、低温(1~3℃)进行,以保持酶活性; b、利用缓冲液以维持一定PH c、介质为等渗溶液,以保持细胞结构的完整; d、加入一定保护剂,如巯基乙醇,保护酶的-SH 二、分级分离法 缺点: a 易受污染(细胞碎片多) b 分离出的酶或细胞器与植物体内的活性或形状不一定一致。 c 非无菌操作会改变酶活性。 三、免疫化学法 免疫化学:研究外源物质侵入机体后所引起的化学反应的性质及机制的科学。 免疫化学技术:一种建立于抗原—抗体特异反应基础上的综合性手段,具有灵敏度高、专一性强的特点。 三、免疫化学法 抗体由厂家生产的试剂盒提供,抗体制备采用杂交瘤技术制备单克隆抗体。杂交瘤将能产生单一抗体的淋巴细胞和有增殖能力的骨髓瘤细胞进行融合形成。 三、免疫化学法 常用两种方法: 放射免疫检测法(RIA): 酶联免疫检测法(ELISA): 固相酶联免疫检测法
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