中药Kacimex胶囊体内抗肿瘤作用及机制的研究.PDFVIP

书收稿日期: 2012-08-13; 修订日期: 2013-01-29 基金项目:广西民族大学重点科研项目( No． 2009MDZD42) 作者简介:杨立芳( 1969-) ，女( 汉族) ，吉林白山人，现任广西民族大学化 学化工学院高级实验师 ， 博士学位 ， 主要从事天然产物分析 、 药理学研究 工作 ． * 通讯作者简介:黄仁彬( 1955-) ，男( 汉族) ，广西灵山人，现任广西医科 大学药学院教授 ， 博士研究生导师 ， 博士学位 ， 主要从事生化药理学研究 工作 ． 中药 Kacimex 胶囊体内抗肿瘤作用及机制的研究 杨立芳 1 ， 黄仁彬 2* ， 焦 阳 2 ， 黄建春 2 ( 1． 广西民族大学化学化工学院，广西林产化学与工程重点实验室，广西 南宁 530006; 2． 广西医科大学药学院，广西 南宁 530022) 摘要: 目的 研究中药 Kacimex体内抗肿瘤的作用及初步机制。方法 建立小鼠肝癌 H 22 实体瘤模型 ， 观察 Kacimex 胶囊 对荷瘤小鼠胸腺 、 脾脏等免疫器官的影响 ; 通过黄嘌呤氧化酶法 、 硫代巴比妥酸显色法观察 Kacimex 各浓度组对荷瘤小鼠 血清中超氧化物歧化酶 ( SOD) ， 丙二醛 ( MDA) 含量的影响 ; 免疫组化法观察 Kacimex 各浓度组对 H 22 荷瘤小鼠瘤组织病 理学形态的影响及对凋亡相关蛋白 Bcl － 2、Bax 表达的影响 。结果 中药 Kacimex 能使各浓度组荷瘤小鼠的瘤组织不同 程度的坏死 ; 能显著降低 MDA 含量 ， 提高 SOD 含量 ， 提高荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数 ; Bcl － 2 蛋白的表达下调 、Bax 蛋白的表达上调 。结论 中药 Kacimex能诱导肿瘤细胞凋亡，其机制可能是通过提高机体免疫功能和抗氧化能力使肿瘤 细胞凋亡 、 坏死 ， 从而抑制肿瘤的生长 。 关键词: Kacimex 胶囊 ; 抗肿瘤 ; 免疫功能 ; 抗氧化能力 ; 凋亡 DOI 标识: doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2013． 04． 044 中图分类号: Ｒ285． 5 文献标识码: B 文章编号: 1008-0805( 2013) 04-0869-02 目前，肿瘤仍是一种危害人类最多的疾病。临床上治疗癌症 采用的放疗、化疗毒副作用大，严重影响病人的身心健康。天然 药物以毒副作用小，来源广、产量高、药用潜力大等优势在生命科 学领域中，受到研究者的青睐。Kacimex 胶囊采用灵芝、三七及 西南文殊兰等中草药，由本课题组与越南重大疾病研究院合作研 究的中药制剂。迄今，我们已从体内和体外两个方面 证 实 了 Kacimex 胶囊具有一定的抗肿瘤作用［1］。在此基础上，我们拟就 Kacimex 胶囊体内抗肿瘤作用和机制进行初步研究，为 Kacimex 胶囊的临床应用提供实验数据。 1 材料 1． 1 动物与瘤株 昆明种小鼠，雌雄各半，体质量 18 ～ 22 g，由广 西医科大学实验动物中心提供( 试验动物生产许可证: SCXKG 桂 2003 － 0003，试验动物使用许可证: SYKG 桂 2003 － 0005) 。 小鼠肝癌 H 22 荷瘤小鼠种源，由广西中医药研究所药理室提 供。 1． 2 试剂及药物 Kacimex 胶囊越南重大疾病研究院提供; 注射 用环磷酰胺购置于江苏恒瑞医药股份有限公司; ＲPMI － 1640 培 养基购置于美国，GIBCO; 一抗 bcl － 2、Bax 购置于 U． S． A． Santa Cruz Biotechnology; 即用型二步法( 非生物素) PV6001 兔二步法 检测试剂盒、DAB 显色试剂盒均购置于北京中杉金桥生物技术 有限公司; MDA 试剂盒、SOD 试剂盒购置于南京建成生物工程研 究所。 2 方法 2． 1 H 22 荷瘤小鼠肿瘤模型的建立 取腹腔传代 7d 且生长良好 的小鼠肝癌 H 22 荷瘤小鼠，脱颈处死，用 75% 的乙醇消毒动物皮 肤。无菌条件下，小心剪开小鼠腹腔，吸取腹水，腹水用生理盐水 按 1∶ 2 比例稀释，吹打混匀，调整细胞数为 2 × 106 个 /ml。将细 胞悬液皮下接种于小鼠右腋下，0． 2 ml /只，制成局灶性肿瘤模 型。 2． 2 小鼠分组及给药 将腋下接种 H 22 细胞 24 h 后的小鼠随机 分为 5 组，每 组 10 只: 环 磷 酰 胺 阳 性 对 照 组 ( 20 mg· kg －1· d －1 ) ，腹腔注射给药; Kacimex 高、中、低 3 个剂量组( 9，6，3 g· kg －1 ·d －1 ) ，灌胃给药; 模型组，灌胃生理盐水。每日称重，连续 给药 10 d。 2．