人新型脱细胞真皮制备及性状分析.PDFVIP

中国组织工程研究 第 20 卷 第 7 期 2016–02–12 出版 Chinese Journal of Tissue Engineering Research February 12, 2016 Vol.20, No.7 P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org 1006 ·研究原著· www.CRTER.org 姜涛，男，1989 年生， 山东省临沂市人，汉族， 徐州医学院在读硕士，主 要从事脂肪干细胞及支 架材料修复创面的研究。 通讯作者：金培生，教授， 主任医师，硕士生导师， 徐州医学院附属医院整 形外科，江苏省徐州市 221002 中图分类号:R318 文献标识码: A 文章编号:2095-4344 (2016)07-01006-07 稿件接受：2015-12-07 http://WWW. 人新型脱细胞真皮制备及性状分析 姜 涛，张爱君，李雪阳，马志兵，沈才齐，金培生(徐州医学院附属医院整形外科，江苏省徐州市 221002) 引用本文：姜涛，张爱君，李雪阳，马志兵，沈才齐，金培生. 人新型脱细胞真皮制备及性状分析[J].中国组织工程研究，2016， 20(7):1006-1012. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.07.013 ORCID: 0000-0002-0269-5040(金培生) 文章快速阅读： 文题释义： 脱细胞真皮基质生物材料技术特点：采用复合酶溶液法脱表皮，仅用三四小时就能将表皮和真皮完全 分离；超声技术脱细胞，两三小时将细胞破碎后去除；采用胰蛋白酶和超声联合作用修饰空间结构， 增加胶原纤维间隙，提高植入后血管化速度；戊二醛溶液对细胞外基质进行交联及甘氨酸溶液中和等 方法，制成的脱细胞猪真皮基质，完全去除了细胞成分，免疫原性低，生物相容性好。 摘要 背景：早期快速血管化是创面修复的关键。高孔隙率、大孔径的真皮支架可以促进种子细胞更快更好的 黏附、生长、迁移并促进创面修复中血管化的快速形成。 目的：通过改良人脱细胞真皮基质制备方法，以期得到孔隙率高、细胞渗透性更好、组织相容性良好的 同种异体皮。 方法：健康成人皮肤，分别用传统方法及改良方法脱去细胞成分。改良方法采用无菌条件下剪除皮下脂 肪组织，1 mol/L NaCl 溶液 37 ℃ 24 h，去表皮，2%NaOH 45 ℃摇床处理 4 h，PBS 冲洗至溶液成中 性，冷冻干燥，4 ℃保存备用。对两种方法制备脱细胞真皮基质孔隙率、体外降解时间的差异及材料浸 润液对脂肪干细胞毒性进行检测；苏木精-伊红染色、扫描电镜检测其脱细胞效率、胶原完整性、脂肪 干细胞细胞相容性及支架孔隙等。 结果与结论：两种处理方法均可完整脱去细胞成分，并较好保持胶原支架的完整性；改良型脱细胞真皮 基质孔隙率达(93.22±0.99)%明显高于传统(74.28±2.06)%(P 0.001)；体外降解时间无明显差异(P 0.05)；改良方法制备脱细胞真皮材料浸润液对干细胞无明显细胞毒性；改良脱细胞真皮基质基底面接 种细胞 3-7 d 后细胞可突破基底层并迁移、游走至真皮深面，传统脱细胞真皮基质中细胞在基底面单- 复层生长，无明显真皮浸润。结果提示新型脱细胞真皮基质拥有较传统脱细胞真皮基质更大的孔径、孔 隙率，更适合细胞的浸润生长。 关键词： 组织构建；组织工程；脱细胞真皮；种子细胞；干细胞；脂肪干细胞；生物支架；组织相容性；创面修 复；组织工程皮肤 主题词： 真皮；干细胞；脂肪组织；皮肤 传统方法及改良方法脱去细胞成分制备脱细胞真皮基质比较 ①两种方法制备脱细胞真皮基质孔隙率、体外降解时间的差异及改良方法 制备脱细胞真皮材料浸润液对脂肪干细胞毒性。②苏木精-伊红染色、扫 描电镜检测其脱细胞效率、胶原完整性、脂肪干细胞细胞相容性及支架孔 隙等。 分别用传统方法及改良方法脱去细胞 成分制备脱细胞真皮基质 旨在得到孔隙率高、细胞渗透性更好，组织相容性良好的同种异体皮 生股骨头坏死危险因素 检测指标 姜涛，等. 人新型脱细胞真皮制备及性状分析 ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH 10