医院-微生物检验标本的留取及质量保证精要.ppt

微生物检验 医院检验科 * 微生物检验标本的留取及质量保证 * 临床微生物室概论 临床微生物实验室：当代的临床微生物实验室的功能不仅是检验的场所，更是与临床感染疾病的流行病史结合、建立、分离、鉴定样品中病原微生物的方法学，并进行药敏试验，开展本单位的耐药检测，为临床医生经验用药和目标用药提供参考依据；结合临床需要开展科学研究，不断建立满足临床工作所需的现行有效的检验项目，淘汰陈旧的、无用的或错误的微生物检验项目；追溯传代源，降低医院感染率的机构。 临床微生物室的工作 病原微生物检测，明确诊断 抗菌药物敏感试验，协助治疗，预后评估 耐药菌检测，细菌耐药性监测 院感侦查 * * 临床微生物实验室 * 微生物检验标本的留取及质量保证 微生物标本的留取 微生物检验的质量控制 * 正确的实验室结果 1、标本的正确留取 2、实验室质量的保证 3、实验结果的正确理解 血标本和骨髓标本 指征：寒战、发热或体温过低、皮疹（粘膜出血）、肝脾肿大、关节疼痛、神志昏迷或休克。当患者高度考虑为血流感染，但外周血培养连续多次阴性时可以考虑做骨髓培养。 时间：患者寒战前、寒战时、或寒战后一小时内采血；使用抗菌药物之前，应立即采集血液做培养（心内膜炎除外）。 采集：严格执行“三步消毒法”乙醇擦拭静脉穿刺部位待30s以上；碘酊作用30s或碘伏作用90s以上，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径3cm以上；70%乙醇脱碘待干。70%乙醇擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60s后用无菌纱布或无菌棉签清除残余乙醇。 用注射器穿刺采血后，直接注入血培养瓶，或严格按血培养瓶厂家推荐的方法采血，接种到血瓶后，轻轻颠倒混匀，防止血液凝固，成人采血5-10ml/瓶（成人） 为最佳。婴幼儿采血量为全血量的1%（1-2ml);骨髓采集量一般为1-2ml。 如果不能立即送到微生物室，自动化仪器配套的血培养瓶可临时室温保存，切勿冷藏。 * 院内获得性感染：入院48小时后，多由耐药的微生物引起 致病微生物：细菌（90％）、真菌、病毒、支原体、衣原体等 ICU常见致病微生物：阳性球菌感染增加、真菌感染增多 铜绿假单胞 不动杆菌 金葡菌 真菌 不同感染部位常见致病菌： 尿路：大肠杆菌、肠球菌 伤口：葡萄球菌、大肠杆菌 呼吸系统；G-多见，近年球菌增多 腹腔感染：多混有厌氧菌 长期应用抗生素：真菌感染，念珠菌（白念）多见 血流感染常见病原体 * 阳性报告 一级报告（初步报告）：报告临床阳性并涂片 二级报告（补充报告）：初步鉴定结果和直接药敏 三级报告（终报告）：菌种名称和标准药敏结果 阴性报告 “血培养经xx天培养阴性” 血培养报告 * Perform venipuncture Place Adapter cap obtain 8-10ml of blood Skin Preparation OR Bottle Preparation * 全自动血培养检测原理 * * 一套 两套 三套 采血份数 Cockerill, CID 2004 研究表明：一套血培养选择1个需氧瓶和1个厌氧瓶组合检测出的葡萄球菌、肠杆菌科菌中某些菌和厌氧菌比一对需氧瓶多。 在发热开始的24h内进行血培养。 尽力保证在抗感染治疗前获得首份血培养标本。 同时经2个独立部位抽取血标本，此结果比单一部位的血培养更有临床意义。除新生儿外，不建议只进行单套血培养（II级）。 48-96h后评估治疗效果，再次血培养不能单取1套，必须同时抽取2套标本（II级）。 但对怀疑血管内的感染，应该间隔一段时间区不同部位的静脉穿刺抽血，有助于诊断持续性菌血症（II级）。 成人：任何时候，绝对不能只送一瓶！ * 指南中强调：血培养至少送2套 Crit Care Med 2008 Vol.36.No.4：CLSI指南：英国指南 导 管 导管相关性感染：诊断依据：导管培养、导管内血培养、外周血培养为同一种菌。除感染症状外还要满足以下某一条件：5cm导管尖端，半定量培养阳性（15CFU），或者定量培养阳性（100CFU)，同时从导管培养出的细菌与外周血培养结果一致（种属和药敏结果）；同时从CVCs、外周静脉抽血送细菌培养，CVCs所取血样培养出现阳性的时间比外周血早2小时以上。 标本送检：1）、导管：用75%乙醇清洁导管周围皮肤，无菌手续移动导管，剪取导管尖端5cm，直接置入无菌容器中，尽快送检。2）、经外周静脉穿刺采血=1套；从导管中心或静脉留置口隔膜采血1套；二者采血的时间接近