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环境微生物学 浅谈微生物实验方法与环境微生物实验方法的同、异 郝帅 11040174023 生物技术 新联学院 摘要：微生物学是生命科学领域中一门重要的基础学科,而微生物学实验是微生物学教学的重要环节.而在显微镜、分离和纯化、分析方法方面，微生物学与环境微生物学相同与改进。 关键字：微生物学 环境微生物学 显微镜 分离和纯化 微生物分析方法 改进 微生物学时生命科学领域涉及面广，应用性很强的一门学科，随着科学的飞速发展，人们由过去被动认识客观事物，发展到积极创造各种实验方法，主动去认识客观事物。作为一名专研生物学的学生，深知生物学是以实验为基础的一门学科，而微生物更注重实验方法的重要性，因微生物在六界中占有四界，既有原核生物，又有真核生物，还有非细胞生物，如病毒；在三域学说中古细菌、细菌域的所有生物都属于微生物，而真核生物域中的原生动物、真菌等也属于微生物，微生物分布于在这三个领域中，由此可见，微生物在生物界中占极重要的地位。（1普通微生物学） 学习过普通微生物学的同学都知道，微生物的特点：体积小，面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快；适应强，易变异；种类多，分布广，可以简称为“小、简、低”。（1普通微生物学）为了能够观察到微生物的存在，微生物观察用的是传统的光学显微镜，根据其结构可分为光学显微镜和非光学显微镜两大类，前者又可分为单式显微镜和复试显微镜，最简单的单式显微镜即放大镜（放大倍数在10倍以上），构造复杂的单式显微镜为解剖镜（放大倍数在200左右），在微生物学的研究中，主要使用复试显微镜，其中以普通光学显微镜最为常用。其原理：将被捡物体置于激光镜和物镜之间，平行的光线自反射镜折入聚光器，光线经过聚集器，光线经过聚光器穿过透明的物体进入物镜后，即在目镜的焦点平面上形成一个初生倒置的实像；从初生实像射过来的光线，经过目镜的接目透镜而达到眼球，这时的光线已变成或接近平行光，在透过眼球的水晶体时，便在视网膜后形成一个智力的实像。（2微生物学实验技术） 一 环境微生物学是建立在实验基础上的操作性很强的一门学科，随着计算机技术的发展之中，以显微镜为主要工具手段的实验教学模式技术也在不断变革之中 ，（3）新的教学模式技术直接推动了显微镜实验教学效果的增强：突破光学分辨率极限的光学显微镜。光学透镜成像而是利用近场光学原理，借鉴扫描隧道显微镜（STM）扫描探针技术，在样品表面上方扫描获得表面信息（[4].）近场光学显微镜与传统光学显微镜的最大区别在于：以纳米级光学探针代替传统光学镜头；样品表面近场区域内存在携带表面精细结构信息的非辐射场，探针被控制于样品表面一个波长以内的近场区域内，可探测到亚微米级光学信息。这样就突破了“阿贝极限”的限制，理论上其分辨率是无限大的。NSOM 的分辨率不依赖于光的波长，使其成为真正意义上的光学显微镜[5]。由于探针尖不能做得无限小和不能无限接近样品，实际分辨率是有限的[6]。近场光学显微镜能克服传统光学显微镜低分辨率以及扫描电子显微镜和扫描隧道显微镜对生物样品产生损伤等缺点，且能进行高分辨率光学像，因此被广泛应用于生物样品的观察[7]. 二 如分离和纯化实验,如果要达到“细胞纯”而不是“菌落纯”,常用10倍稀释法、划线法、挑单孢等方法,其中最有说服力的方法是挑单孢法。但挑单孢法难度大,技术要求高,所以不常使用。现结合10倍稀释法和挑单孢法设计了一种新的方法,该方法适用于单细胞微生物种类及产孢子的真菌和放线菌。【8】 主要器皿:培养平板及盖,毛细管 操作方法:配制培养基,灭菌※平板倒培养基:0.1ｍＬ的培养基注入到每个平板,加盖※制作孢子悬浮液※10倍梯度稀释:稀释成10-1,10-2,10-3,10-4,10-5,10-6,10-7,10-8,10-9,…※用毛细管吸取孢子悬浮液※点样,每小格点一管,显微镜观察孢子数量;直到每格一个孢子为止※培养观察。 这种方法的优点优点是原理和方法简单,适用真菌、细菌和放线菌的分离纯化和诱变育种;分离的菌种纯度高,可达“细胞纯”;可以实时观察孢子萌发、菌丝生长,细菌分裂等现象。但也存在缺点,如真菌的培养时间不能太久,易长出平板小孔,要及时转接；培养基要求透光率高；工作量比较大。 三 生物处理方法已经成为环境工程中废水、废气和固体废物处理的最重要的方法之一。因此，利用微生物分析方法，研究环境工程生物处理工艺中微生