仪器分析之化学品分离方法综述.ppt

同理有效塔板高度为： HPLC与经典LC区别 HPLC的基本原理和分类 三、特点及应用 缺点: （2）固定液 固定液通常是高沸点、难挥发的有机化合物。 固定液的分类 按化学类型分 按极性分 规定角鲨烷的相对极性为零， β，β’—氧二丙睛的相对极性为100， 其它位于两者之间。（教材P22 表2－1） 固定液的相对极性 非极性 弱极性 中等极性 强极性 固定液的选择 a. 按“相似相溶”原则选择，选择与试样性质相近、结构相似的固定相。 非极性组分——选非极性固定液，如角鲨烷、阿皮松等 按沸点顺序出柱，低沸点的先出柱. 中等极性组分——选中等极性固定液 基本按沸点顺序出柱。若同沸点的非极性和极性 物，则按极性顺序出柱，非极性先出峰。 强极性组分——选强极性固定液 按极性顺序出柱，极性弱的先出柱. 酯类——选酯或聚酯固定液 醇类——选醇类或聚乙二醇固定液 固定液的选择 非极性和极性组分的混合物——选极性固定液 按极性顺序出柱，极性弱的先出柱. 能形成氢键的样品——选氢键型固定液，如腈醚、多 元醇等，按形成氢键的能力大小顺序出峰，不 易形成氢键的先出峰。 b. 按组分性质的主要差别选择 —— 选极性固定液 按极性强弱出柱 极性弱的先出柱 —— 选非极性固定液 按沸点顺序出柱 沸点低的先出柱 组分的沸点差别为主 组分的极性差别为主 选非极性柱 —— 分不开； 选中等极性柱 —— 较好分离，环己烷先出柱. 例：苯（80.10C），环己烷（80.70C） 固定液的选择 三、气相色谱分离操作条件的选择 1．载气与流速的选择 2．操作温度的选择 3．色谱柱的选择 4．进样条件的选择 1. 载气与流速的选择 三、气相色谱分离操作条件的选择 选择载气应与检测器匹配 TCD→选H2，He FID→选N2 考虑对柱效的影响 当u较小时，B/u占主要，此时选择分子量大的N2、 Ar 等为载气； 当u较大时， C u占主要，此时选择分子量小的H2、He等为载气。 最佳流速 一般填充柱的流速控制为30～60ml/min 柱温 升高 减小传质阻力、柱效高 降低 分析时间长 增加分子纵向扩散、 柱效降低 2. 操作温度的选择 2. 操作温度的选择 柱温的确定 (1) 柱温应控制在固定液的最高使用温度范围之内。 (3)柱温一般选择在接近或略低于组分平均沸点的温 度。 (4)组分复杂，沸程宽的试样，采用程序升温。 (2)与固定液用量有关，较低固定液用量则较低的柱温 度。 2. 操作温度的选择 气化室温度的确定 气化温度一般较柱温高30～70℃。 检测温度的确定 检测温度不能太高，检测温度高，检测灵敏度低。 除FID外，所有检测器都对温度变化敏感，必须控制 检测器的温度； 3. 色谱柱的选择 担体的选择 柱的选择 种类: 难分离组分→毛细管柱 柱长：柱子长分离效果好，但时间延长，故在满足一 定分离度的条件下，应尽可能用较短的柱子。 内径：增大内径可增加分离的样品，但纵向扩散增 大，柱效降低。 常用60～80目和80～100目的担体。 颗粒小柱效增大，但阻力增加。一般根据柱径选择担 体的粒度，约为柱内径的1/20为宜。 4.进样条件的选择 进样速度必须很快。 柱内径大、固定液用量高可适当增加试样量。但进样量过大，柱效急剧下降。 液体进样量0.5～5μL，气体进样量0.1～10μL 。 固定液配比的选择 与担体比表面积、组分沸点有关。 高沸点组分→低固定液配比（1%～3%） 气体、低沸点组分和宽沸点组分→高固定液配比 （5%～25%） 固定液与担体的质量比，配比通常在1%～25%之间。 四、毛细管色谱 1.毛细管色谱的特点 分离效率高：比填充柱高10～100倍; 分析速度快：比用填充柱色谱速度快; 灵敏度高：一般采用氢火焰检测器; 色谱峰窄，较多采用程序升温方式。 填充柱色谱图 毛细管色谱图 2.毛细管色谱系统 多采用灵敏度高的FID检测器；使用三种气体；有分流和尾吹装置。 毛细管气相色谱结构与流程 毛细管色谱的结构特点： （2）分流后，柱后流出的试样组分量少、流速慢。 解决方法：灵敏度高的氢焰检测器，采用尾吹技术。 分流比：放空的试样量与进入毛细管柱的试样量之比。一般在50：1到500：1之间调节。 毛细管柱内径很细，因而带来的问题： （1）柱容