分子生物学技术在兽医中的应用幻灯片.pptx

分子生物学技术在兽医中的应用 张银亮 2010.10 兽医技术 中兽医： 辨证论治，天人合一 望闻问切，针灸，推拿按摩 兽医技术 西兽医： 对症治疗 抗菌、抗病毒、驱虫 消炎、 分子生物学在兽医中的应用 核酸分子（DNA、RNA、Plasmid）遗传作用 蛋白质分子 生命最基本的表现形式 脂类分子 骨架作用、能量作用 分子： 糖类分子 能量作用、修饰作用 H2O 给各种生物化学反应提供反应环境 气体分子 O2 CO2 NO等运输作用、信号作用 核酸分子在兽医技术中的应用 核心技术：基因扩增技术 PCR（Polymase Cycle Reaction）聚合 酶链式聚合反应，利用基因引物、Taq酶、模板、核苷酸（dNTP）、缓冲液、水、在PCR仪上通过热循环扩增出目的基因片段。 通过核酸检测在兽医中的诊断 基因扩增诊断：通过扩增出病原（细菌、病毒、寄生虫）分子的保守序列就可知动物是否患有该病. 通过核酸检测在兽医中的诊断 基因芯片的工作原理与经典的核酸分子杂交方法(southern、northern)一致，均应用已知核酸序列作为靶基因与互补的探针核苷酸序列杂交，通过随后的信号检测进行定性与定量分析。具体讲即是将许多特定的寡核苷酸片段或cDNA基因片段作为靶基因，有规律地排列固定于支持物上；样品DNA/RNA通过PCR扩增、体外转录等技术掺入荧光标记分子或放射性同位素作为探针；然后按碱基配对原理将两者进行杂交；再通过荧光或同位素检测系统对芯片进行扫描，由计算机系统对每一探针上的信号作出比较和检测，从而得出所需要的信息 基因芯片检测 基因芯片检测诊断（核酸杂交）：将一个或多个基因片段的保守序列吸附在薄膜载片上，将待检样品滴加在基因芯片上，通过基因芯片检测仪可以检测一种或多种病原。 基因治疗 基因工程疫苗 转基因动物抗病育种 蛋白质分子在兽医技术中的应用 核心技术：蛋白质表达技术 诊断 抗原检测诊断（蛋白质芯片|蛋白质杂交）：将一个或多个保守基因片段的蛋白质表达产物吸附在薄膜载片上，将待检样品滴加在蛋白质芯片上，通过显影技术或者肉眼即可检测一种或多种病原。 抗原检测诊断（抗原抗体反应）：将我们表达的蛋白质产物和待检血清通过酶联免疫吸附试验（ELISA）、琼扩实验、凝集试验等即可作出诊断。 应用蛋白质表达技术治疗 直接合成蛋白质治疗,如胰岛素治疗，由于蛋白质表达成本较高在兽医技术中的应用还较少。 人工制备高免血清治疗疾病 （自家血治疗） 高免血清：人工合成的保护性抗原蛋白给健康动物加以佐剂给动物进行免疫，免疫后采血后分离血清制得高免血清可以给患病重的动物人工被动免疫治疗。 应用蛋白质表达技术预防疾病 人工主动免疫：合成肽疫苗，合成保护性抗原蛋白辅以佐剂给动物进行免疫，免疫后动物可产生较高水品的保护性抗体。 分子生物学在兽医中应用目前存在的一些问题