特殊毒性试验讲述.ppt

致癌毒性试验 致癌物评价程序 化学物的结构分析 短期致突变试验 短期动物致癌试验 长期动物致癌试验 肿瘤流行病学研究 (2) 内分泌调控剂 (3) 免疫抑制剂 主要改变内分泌系统平衡及细胞正常分化，常起促长剂作用。如乙烯雌酚、雌二醇、硫脲 主要对病毒诱导的恶性转化起增强作用。如嘌呤同型物 (4) 细胞毒剂 可能引起细胞死亡，导致细胞增殖活跃及癌发展。如次氮基三乙酸、氯仿 (5) 过氧化物酶体增殖剂 可导致细胞内氧自由基过量生成。如祛脂乙酯、邻苯二甲酸乙基己酯 (6) 固态物质 物理状态是关键性因素，可能涉及细胞毒性。如塑料、石棉 3. 未分类 二恶烷、美舍吡伦 助致癌物（cocarcinogens）：不具有引发和促长作用，但可以促进引发作用和增强促长作用，即能促进或增强全部致癌过程 。如乙醇、二氧化硫 第三节 观察化学毒物致癌作用的基本方法 化学致癌物的判别 人群流行病学调查：两项以上由不同研究者在不同地点、不同对象中以不同调查方法获得的结论相符的证据； 动物实验证据：两项按现行常规设计进行，符合GLP（good laboratory practice），在不同物种动物中所得结果一致的动物致癌物鉴定资料。 化学致癌物的判别 定性判别：受试物能否致癌； 定量判别：剂量-反应关系分析 致癌物判别方法 短期试验； 动物致癌试验； 人类流行病学调查 一、短期试验 依据是致突变性与致癌性相联系 （一）致突变试验 对致癌物的筛选需一组致突变试验，最好每一遗传学终点均有一个试验 若一项阳性，即可认为该受试物为致突变物，因而就可能是遗传毒性致癌物 国际环境致突变物致癌物防护委员会(ICPEMC)于1983年提出致突变试验的遗传学终点分为5类 DNA完整性的改变 DNA重排或交换 DNA碱基序列改变 染色体完整性改变 染色体分离改变 （二）细胞转化试验 受试物与正常细胞在体外接触，如有致癌作用，可使正常细胞形态、功能发生变化，发生与癌细胞相似的过程 观察内容：生长自控能力、细胞形态、细胞生长能力、生化表型以及移植于动物体内形成肿瘤的能力等 应用于细胞转化试验的细胞 原代细胞：叙利亚仓鼠胚胎细胞 (SHE细胞)、人类成纤维细胞、小鼠皮肤或大鼠支气管上皮细胞等 细胞系：BALB/C-3T3，C3H10T1/2和BHK-21 病毒感染细胞：RLV/RE细胞(劳舍尔白血病病毒感染的Fisher大鼠胚胎细胞)和SA7/SHE细胞 (猿猴腺病毒感染的SHE细胞) 恶性变的细胞表现 细胞偏大，且大小不等 核大而畸形，染色质深染而粗糙，核浆比例倒置，核膜粗厚，核仁增生而肥大 核仁核胞浆因RNA增多而偏酸性，呈嗜碱性染色而偏蓝 多见核分裂现象 接触抑制消失 生长表型的改变 一种有限的动物试验（limited in vivo bioassay）。它是在有限的短时间内完成而不是终生，其观察的靶器官也限定为一个而不是全部器官和组织 （三）哺乳动物短期致癌试验 常用的哺乳动物短期致癌试验 小鼠肺肿瘤诱发试验 小鼠皮肤肿瘤诱发试验 雌性大鼠乳腺癌诱发试验 大鼠肝转变灶试验 在给予受试物后，多次持续给予促长剂 阳性结果：与长期动物致癌试验相当。由于试验期较短，又未检查其他器官和系统，特别是皮肤肿瘤和乳腺癌的诱发试验似乎仅适用于较小范围的化学物质 阴性结果：意义较差 * * 肿瘤(tumor，neoplasm) ：有分裂潜能的细胞受致癌因素作用后发生恶性转化和克隆性增生所形成的新生物 良性肿瘤：呈膨胀生长，与周围组织有明显的界限，多有包膜，它们生长常有“自限性”，对机体破坏较小 恶性肿瘤：癌和肉瘤 癌(carcinoma)：由上皮细胞来源的恶性肿瘤 肉瘤(sarcoma)：由间质细胞来源的恶性肿瘤 凡能引起动物和人类肿瘤、增加其发病率或死亡率的化合物 化学致癌物 (chemical carcinogen) 化学致癌物在体内引起肿瘤的过程 化学致癌作用 (chemical carcinogenesis) 第一节 化学致癌的机制 前致癌物 一、与致癌作用有关的代谢 近致癌物 终致癌物 代谢酶 代谢酶 多态性 多态性 不直接致癌，必须在体内经代谢转化，其代谢产物才具致癌作用的化合物 前致癌物经代谢活化过程形成一种或一系列中间代谢产物，必须经进一步代谢活化，才能形成终致癌物 前致癌物 (precarcinogen) 近致癌物 (proximate carcinogen) 直接致癌物和间接致癌物经代谢活化