液体闪烁技术在中医药研究中的应用及展望.docVIP

液体闪烁技术在中医药研究中的应用及展望 澳门大学中华医药研究院 汪 潜 摘要： 随着新技术，新方法在医药领域中的不断涌现，液体闪烁技术已经越来越受到中医药学者的重视和亲睐，现已广泛应用于中医药学研究的各个领域，本文旨在通过对该技术的功能特性和技术指标，以及它在中草药研究，中医学基础研究，临床医学研究以及生物学研究现状的介绍，以期对这项技术有更加全面的认识和前景展望。 关键词： 液体闪烁技术 中医药 应用 展望 液闪闪烁技术是一种利用液体闪烁计数器进行体外放射性测量的技术，它利用闪烁材料，如荧光剂将放射性同位素的辐射能变为光能，再利用对光特别敏感的光电倍增管将光能变为电脉冲，从而测定射线的数量和能量。这种测量技术主要用于探测离体样品中3H、14C等发射的穿透力很弱的软β射线，也可用于探测其它穿透性不强的射线，如俄歇电子，内转换电子，α粒子、β+粒子、质子、慢中子、低能Х或Т线等，具有灵敏度高、特异性强等优点。 随着这一技术的应用在中医药学的研究领域中不断深入，它已经成为沟通传统医学与现代医学的重要渠道，为中西医结合的研究作出了很大贡献。到目前为止，该技术已广泛应用于中医药学研究的各个领域，现将有关的资料综述如下: 一、功能特性与技术指标 首先，液体闪烁技术主要用于3H、14C放射性同位素等发射的穿透力很弱的软β射线的探测，对于无淬灭样品，3H的探测效率可以达到60%以上，14C的探测效率可以达到95%以上，仪器采用了先进的淬灭校正，使得测量结果不受样品体积和测量杯材料的影响，从而可以获得更加准确的cpm及dpm值。其次，仪器可以自动显示单光子记数的强度，有效控制化学发光和磷光给测定结果带来的误差，仪器的多道记数装置，能显示和打印被测样品的能谱，用于能谱显示，放射性元素的鉴定和样品淬灭程度的观察。最后，在对样品的测量过程中，我们必须先对射线的种类，测量时间，误差控制水平，是否作淬灭校正等等提出要求，以便选择合适的指令牌，同时，制样人应该对样品的情况，即是否有单光子发射，样品吸附，分层，淬灭程度等有一定了解，以便在测量中得到有效的控制和消除，尽可能提高测量结果的准确性。 二、中草药研究中的应用 在已建立的40多种免疫检测中草药有效成分的方法中，放射免疫分析占70%以上［１］，由于多采用3H标记，因而液闪技术就显得尤为重要。如青蒿素、青蒿酯检测方法的建立。国外有学者应用该技术建立了测定钙质生成植物中的总vd衍生物的方法［２］，等等。 近年来液闪技术在中药药理研究中的应用更加广泛。它不仅可以用来测定生药及其在人体中的有效成分，以及用药后人体各微量生物活性物质含量变化，而且为中药药理研究深入到分子水平做出了很大贡献。 在中药有效成份的研究中，大枣、茵陈、丹参等中药中环核苷酸的含量，哈士蟆油中的睾酮、孕酮、雌二醇等甾体激素等，都可用液闪进行测量。周文浴［３］等人以3H小檗碱、3H冰片为示踪剂，观察大鼠外敷中药消炎灵的透皮吸收，用液体闪烁计数器检测用药大鼠血液、脏器组织、粪、尿的放射性，结果表明3H:冰片的可能透皮量不足外敷总量的5%，外敷的3H小檗碱也大半留在体外;提示外敷中药是能部分透过皮肤的，但透皮量有限，且又因组分不同而异。推测外敷中药对病变组织除可起部分直接作用外，可能还通过其它机制起作用。 此外，液闪技术还可以测定体外样品中血栓素、前列腺素、环磷酸腺苷、皮质酮等微量物质含量。观察用药后这些微量物质含量变化是阐明中药作用机理及指导临床用药的重要依据。邓常青［４］等通过检测兔脑缺血再灌注损伤模型脑血栓素TXB2-6酮前列腺素F1a以及血浆和脑环磷酸腺苷的含量，对组成益气活血方的黄芪和活血方的作用机理进行了比较研究，发现活血方和益气活血方均可抑制兔脑缺血再灌注后脑TXB2的升高，提高脑6-酮-前列腺素F1a含量。活血方还可抑制脑CAMP的升高，黄芪则对此无明显影响。提示益气活血法通过改善脑局部TXA2 / PGI2平衡而起作用，且主要为活血药物作用。在研究固真方以老年大鼠海马和下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴(HPA轴)的作用中［５］通过检测血浆皮质酮含量，发现固真方能显著降低老年大鼠增高的血浆皮质醇含量，结合糖皮质激素受体分析结果，加深了对该方延缓老年大鼠海马和HPA轴退化作用的认识。余林中 ［６］等人在研究凉膈散解热作用机理中发现，该药能抑制中枢性发热介质PGE2、CAMP合成释放，继而影响丘脑下部体温调节中枢。 近年来，随着分子生物学的发展，液闪技术在中药药理研究深入到分子水平的过程中发挥了很大作用。李应东［７］等人以外周血淋巴细胞非程序DNA合成(UDS)为观察指标，用3H标记DNA合成前体物质，通过液闪测量研究了莪术和硫酸镍的遗传毒性效应及莪术对硫酸镍诱导的人外周血淋巴细胞UDS的影响，