第15章免疫细胞标志与功能检测技术详解.ppt

齐齐哈尔医学院免疫 感染性疾病，T细胞会形成对病原微生物的免疫记忆，在体外分离到T细胞后，培养增殖T细胞的同时加入相应病原的特异抗原进行刺激，激活该细胞的记忆，有记忆的细胞会分泌γ-干扰素，通过检测γ-干扰素的量可以反映T细胞情况。 （二）抗原特异性T细胞增值试验 了解 齐齐哈尔医学院免疫 通过TCR与MHC-肽的特异性相互作用，来检测抗原特异的T细胞，了解机体的免疫状况。 （三）MHC-肽四聚体技术 了解 齐齐哈尔医学院免疫 四、不同细胞分离方法的综合评价 早期：根据不同免疫细胞的物理属性和生物学属性进行分离 近期：利用细胞表面标志进行分离 了解 齐齐哈尔医学院免疫 1.分离外周血单个核细胞，单次差速密度梯度离 心法常用分层液是（ ） A 明胶 B 右旋糖酐 C Ficoll分层液 D Percoll分层液 E 葡聚糖 2.Ficoll液单次密度梯度离心后外周血细胞分布由上至下依次为（ ） A 单个核细胞、血小板和血浆、粒细胞、红细胞 B 血小板和血浆、粒细胞、单个核细胞、红细胞 C 血小板和血浆、单个核细胞、粒细胞、红细胞 D 血小板和血浆、单个核细胞、红细胞、粒细胞 E 血小板和血浆、红细胞、单个核细胞、粒细胞用玻璃纤3.维或葡聚糖凝胶Sephadex-G10柱分离细胞时，从柱上洗脱下的细胞主要是( ) A．粒细胞 B．淋巴细胞 C．单核细胞 D．T细胞 E．B细胞 C C B 齐齐哈尔医学院免疫 4.采用Ficoll密度梯度分离法分离得到的细胞主要为（ ） A 单核细胞和粒细胞 B 单核细胞 C 淋巴细胞 D 淋巴细胞和单核细胞 E 淋巴细胞和粒细胞 5.Percoll分离液的主要成分是( ) A．聚蔗糖 B．泛影葡胺 C．聚乙二醇 D．聚乙烯吡咯烷酮 E．经聚乙烯吡咯烷酮处理的硅胶颗粒 6.分离人外周血淋巴细胞分层液的最佳密度为( ) A.1.030 B.1.035 C.1.092 D.1.020 E.1.077 7.Ficoll淋巴细胞分离液的主要成分是( ) A．聚蔗糖 B．泛影葡胺 C．聚乙二醇 D．聚蔗糖+泛影葡胺 E．聚蔗糖+聚乙二醇 D E E D 齐齐哈尔医学院免疫 第二节  淋巴细胞标志及 亚群分类 齐齐哈尔医学院免疫 细胞表面分化抗原 (Cluster of differentiation CD) CD1a------CD350 齐齐哈尔医学院免疫 (一)CD3+CD4+CD8-辅助性T细胞 (Th) CD3+CD4+CD30- Th1 CD3+CD4+CD30+ Th2 (二)CD3+CD4-CD8+细胞毒性T细胞(CTL) (三)调节性T细胞 CD4+CD25+Foxp3+ Tr1–IL-10 Th3–TFG-β 一、T细胞表面标志及亚群 熟悉 CD4+ Th细胞亚群分化的调节作用 齐齐哈尔医学院免疫 CD抗原 CD2 CD3 CD4 CD8 CD25 CD28 CD40L 特异性 全部T细胞和部分NK细胞(E受体) 成熟T细胞 (特征性标志) 辅助性T细胞 (HIV受体) 细胞毒性T细胞 活化T细胞(IL-2R) T细胞 活化T细胞 T细胞表面主要CD抗原及其特性 齐齐哈尔医学院免疫 mIg(鉴定B细胞的指标) Fc受体 补体受体 EB病毒受体 CD分子:CD19 小鼠红细胞受体 二、B细胞表面标志 熟悉 分类: B1(CD19+CD5+) B2(CD19+CD5-) B-1细胞和B-2细胞的异同 齐齐哈尔医学院免疫 CD抗原 CD21 CD35 CD40 CD80/86 CD19/CD5 特异性 EB病毒受体 活化B细胞 与CD40L结合活化B细胞 与T细胞CD28结合，活化T细胞 B1双阳；B2仅为CD19+ B细胞表面主要CD抗原及其特性 齐齐哈尔医学院免疫 CD3-CD56+CD16+ 三、NK细胞表面标志 （nature killer cell,NK) 熟悉 复 习 1.对细胞液分离的要求？ 2.从PBMC中得到淋巴细胞的方法？ 3.成熟T细胞表面主要标志？ 4.B细胞根据什么主要标志分为何种亚群？ 齐齐哈尔医学院免疫 抗原提呈类细胞表面标志 第三节 抗原提呈细胞的表面标志 CD1a,CD11c,CD83 齐齐哈尔