伊立替康UGTA检测.PPTVIP

源于生命，创造奇迹 UGT1A 基因簇,共包含17个外显子(图1) ,共用2～5外显子,编码UGT1A蛋白共同C末端,是尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDPGA)结合域,共有246个氨基酸残端,组成了UGT1A的保守序列;其余13个外显子,均为第1 外显子, 序列有37% ～90%的同源性, 编码UGT1A蛋白特异的N端,有285个氨基酸残基,是UGT1A的底物识别区。13个第1外显子共编码9种功能性UGT1A 蛋白( UGT1A1、UGT1A3、UGT1A4、UGT1A5、UGT1A6、UGT1A7、UGT1A8、UGT1A9、UGT1A10 ) 和4 个假基因(UGT1A12P、UGT1A11P、UGT1A13P、UGT1A2P) A（腺嘌呤）、T（胸腺嘧啶）、G（鸟嘌呤）、C（胞嘧啶) UGT1A1检测 UGT1A1在临床检测的意义 UGT1A1检测的方法学和检测流程 内容概要 毒性反应: 伊立替康使用时永远的担忧? 拓扑异构酶I的抑制剂 1996年被FDA批准上市 适应症: 晚期结直肠癌、晚期肺癌 毒性反应: 致死性严重腹泻 * UGT1A1基因型检测的临床意义 1、ＵＧT１Ａ１基因多态性检测可降低临床盲目使用伊立替康产生毒副作用的风险（腹泻和粒细胞减少）。 2、进一步明确不同基因型和剂量调整的关系。 　ＣｈｉｎｅｓｅＣｌｉｎｉｃａｌＯｎｃｏｌｏｇｙ，Ａｐｒ．２０１１，Ｖｏｌ．１６，Ｎｏ． UGT1A1 是一种什么酶 尿苷二磷酸葡糖醛酰转移酶（UGTs)是一大类能催化葡萄糖醛酸与亲核底物结合的膜结合酶，主要存在于肝脏 人类的UGTs被分为UGT1，UGT2两个家族 UGT1的基因至少包括13个亚型：UGT1A1，UGT1A3-10，UGT1A12P、UGT1A11P、UGT1A13P、UGT1A2P UDP-葡萄糖醛基转移酶 1A1（简称UGT1A1 ） ，参与多种物质的葡萄糖醛基化，这一结合反应的目的在于增加底物的水溶性，增加从胆汁和尿液中的排泄量，达到物质代谢、解毒的目的。 * UGT1A1 UGT1A1 *1 A(TA)6 TAA UGT1A1 *27 686 CA UGT1A1 *29 1099 AC UGT1A1 *6 211GA UGT1A1 *28 A(TA)7 TAA UGT1A1 *33 A(TA)5 TAA UGT1A1 *34 A(TA)8 TAA UGT1A1 G-3156A 启动子区 EXON Genet Med 2009:11(1):21–34 不同人群的发生基因型或突变概率略有不同！ 伊立替康肝脏代谢途径及酶与基因的关系 UDP-葡萄糖苷酸转移酶1A1（UGT1A1)是关键代谢酶 UGT1A1基因型分布与毒副作用发生率的关系 Based on data from Innocenti et al (2004) Group 分布频率 毒性反应出现率 All Patients ----- 10% Patients That Are 7/7 10% 50% Patients ThatAre 6/7 40% 12.5% Patients That Are 6/6 50% 0% UGT1A1不同基因型与伊立替康剂量调整 还没有共识明确的调整方案！ 基因型 剂量调整 Patients That Are 7/7 减量一半/密切观察 Patients ThatAre 6/7 正常剂量/密切观察 Patients That Are 6/6 正常剂量 UGT1A1*6基因型分布于毒副作用发生率的关系 Based on data from Innocenti et al (2004) 基因型(211) 分布频率 毒性反应出现率 All Patients ----- A/A / 风险较高 G/A / 部份报到有 G/G / 低 UGT1A1*6不同基因型与伊立替康剂量调整 还没有共识明确的调整方案！ 基因型 剂量调整 A/A 减量一半/密切观察 G/A 正常剂量/密切观察 G/G 正常剂量 UGT1A1基因检测流程 EDTA抗凝2-3ml外周血 认真阅读检测工作事宜内容 填写纸质申请单 冷藏运输(3天） 周一至周四下午四点之前 标本送至指定地点 认真阅读检测工作事宜内容 样本信息登记 安排实验时间 审核 发送电子报告 （客户通讯录） DNA抽提,PCR扩增， 毛细管电泳，结果分析 外周血样本采集 检测报告 样本寄送 样本信息核对 检测实验 整个过程在2个工作日完成 UGT1A1检测实验操作流程示意图 PCR产物进行毛细管电泳（genescan） 外周血、组织 纯化基因组DNA Real-time