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实验目的 了解密度计、折光仪和旋光仪的工作原理 掌握食品密度、折光度和旋光度的测定方法 了解不同测定方法之间的差异 学会分析和排除影响测定结果的干扰因素 2、实验器材 水浴:温度保持在20±0.05℃。 干燥器:带有干燥剂。 恒温箱。 比重瓶:50mL,具有毛细管装置。 这种比重瓶包括一个大约50mL容量的小烧瓶,盖以圆塞,还有一个长6cm,内径小于4mm的管颈,并在颈1/2处有一标准线或称刻度线。 玻璃漏斗,直径为10cm,以滤纸作芯子。 玻璃毛细管。 锥形瓶:500mL 4、计算: 比重=(W2-W0)/(W1-W0) W0—比重瓶重量(g)W1—比重瓶和水的重量(g)W2—比重瓶和样品的重量(g) 2、实验材料 密度计 量筒 果汁(苹果汁) 思考题 密度测定有什么意义? 如何提高密度测定的准确性? 实验内容 用折光法测蔗糖溶液浓度 旋光法测木薯淀粉含量 实验原理 在加热及稀盐酸作用下,淀粉水解并转入盐酸溶液中。在一定的水解条件下,不同作物淀粉的比旋光[α]D20是不同的。 旋光法测木薯淀粉含量 实验器材及试剂 CaCl2-HAc溶液:溶解5份重的CaCl2.2H2O于6份水中,调节其密度(20℃)为1.30,用pH计测定pH至2.3,过滤至清澈为止; 30%ZnSO4溶液; 15%亚铁氰化钾溶液; 旋光仪; 电热恒温甘油浴。 旋光法测木薯淀粉含量 操作步骤 1、木薯淀粉纯品的制取 将制得的木薯淀粉粗品用3%的NaOH溶液洗涤,搅拌几分钟,上离心机离心,抽去上清液,重复3~4次要抽去的上清液显无色纯净为止。再用无水甲醇清洗,搅拌几分钟,上离心机离心,抽去上清液,重复3次,放入真空干燥箱中(55~56℃)干燥,即得木薯淀粉纯品。 旋光法测木薯淀粉含量 木薯比旋值[α]D 称取木薯淀粉纯品1.000于250ml三角瓶中,加60ml CaCl2-HAc溶液,放在120±1℃恒温油浴中,使之沸腾,恒温半小时,取出冷却,用水洗至100ml容量瓶中,加1ml 30% ZnSO4溶液充分摇匀后再加1ml 15%亚铁氰化钾溶液,再摇匀,用水定容,用慢速滤纸过滤,滤液用于测定。 n次平行实验。 旋光法测木薯淀粉含量 将滤液倒入旋光仪的旋光管中上旋光仪,读其旋光度,代入公式: 淀粉含量={(α×100)/W×L×[α]20D }×100,求出[α]20D ? 旋光法测木薯淀粉含量 样品的测定 称取磨细的烘干样品2.5000g于离心管中,取鲜样测水份 先用石油醚脱脂,后加入86%酒精150ml搅拌几分钟,上离心机离心,抽掉上清液。 将离心管底部沉淀物用60mlCaCl2-HAc溶液完全洗入250ml三角瓶中,在118±1℃的恒温甘油浴中恒沸半小时,取出冷却,完全洗入100ml容量瓶中 加1ml ZnSO4溶液摇匀,再加1ml亚铁氰化钾溶液,摇匀,用水定容。 用慢速滤纸过滤,滤液倒入旋光仪旋光管中,在旋光仪上读出旋光度, 旋光法测木薯淀粉含量 代入以下公式求出淀粉的百分含量: 淀粉含量(%)={(α×100)/W×L×203 }×100 式中:W:样品重量(g) L:旋光管长度(dm) 注意事项 木薯中可溶性糖含量较高,用80%的酒精脱糖,用石油醚脱脂。 氯化钙溶液可作为淀粉的提取剂,因为钙可以与淀粉分子上的羟基形成配合物,使淀粉与水有实高的亲和力而易溶于水中 淀粉溶液加热后,必须迅速冷却,以防止淀粉老化,形成高度晶化的不溶性淀粉分子微束。 硫酸锌溶液的作用中沉淀蛋白质,因为蛋白质也有旋光性,蛋白含量较高的样品用旋光法测结果偏低,误差较大。 淀粉的比旋光度一般以203°计,但不同来源的淀粉也有不同,如玉米、小麦淀粉为203°,但豆类淀粉为200°。 可溶性糖类的比旋光度比淀粉的低得多,因此对可溶性糖类含量不高的谷物样品,其影响可忽略不计。但糊精的比旋光度较高,对结果的影响较大。 此法是采用盐酸水解法,其中Cl-浓度会影响比旋光度,所以要在转化前测定中加入NaCl, 使生成等量Cl-, 这样便可避免盐酸转化后Cl-的影响 思考题 折光法和旋光法测出的蔗糖浓度是否一致? 旋光仪和折光仪的工作原理是什么? 如何提高旋光度测定和折光度测定的准确率? ?????????????????????????????? ?????????????????????????????? ????? ??? 图5-3 光折射示意图??????????????????? 图5-4 仪器构造示意图 在固定一种介质时,临界折射角rc的大小和折射率有简单的函数关系。 当入射角为 90°时,上式可写成: n2=n1·sinrc 高折射率型阿贝折光仪 2、实验器材 折射仪,糖度计,
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