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体外下丘脑神经细胞培养技术探讨
体外下丘脑神经细胞培养技术探讨
陕西医学高等专科学校组织学与胚胎学教研室 (西安 710068)
王 兰 郑慧媛 宋天保3 赵 璇 石明娟 王多宁3 3 杨 颖3 3 孟 洁
摘 要 目的: 探讨体外下丘脑神经细胞培养的技术。方法: 选用生后 1~ 3d 的 SD 大
鼠, 取下丘脑组织进行单细胞原代培养。结果: 培养 1d, 神经元胞体小, 圆形或梭形, 无突起
或突起极短; 培养 3d 时, 胞体明显增大, 突起长度增加; 到培养 7d, 神经元的胞体截面积和
突起长度均达到最高峰, 分别为 161. 63±21. 17Λm 2 和 103. 51±21. 33Λm; 到 14d 时, 神经
元的胞体截面积和突起长度基本维持在 7d 时的水平。结论: 培养前 7d 是下丘脑神经元体外
生长成熟的关键时期, 这种良好的发育状态可维持到 14d。体外下丘脑神经细胞培养技术的
关键在于准确的取材部位, 良好的单细胞悬液的制备, 尤其是贴壁物的选择。
主题词 细胞培养 神经元 下丘脑 体外研究
On techn iques for culture of nerve cells from hypotha lam us
D epartm en t of H isto logy and Em b ryo logy, Shaanx iM edica l
Co llege (X i’an 710068) W ang L an Zheng H u iyuan Song T ianbao et a l
ABSTRACT O bject ive: To find ou t the best techn iques fo r cu ltu re of nerve cells from
hypo thalam us. M ethods: R ats aged 1~ 3 po stnatal days w ere used. T issue b lock s from hypo thalam usw ere
removed and dispersed cells w ere cu ltu red in vitro. R esu lts: T he p rocesses of nerve cells iso lated from the
rat hypo thalam us w ere found as early as on the first day of cu ltu re. D uring 1~ 3 days in cu ltu re neu rons
grew fastest. T he cell body area and p rocess length of nerve cells reached their h ighest levels (161. 63±
21. 17Λm 2 and 103. 51±21. 33Λm , respect ively)on the 7th day. O n the 14th day, the som a size and p rocess
length w ere m ain tained at the level of the 7th day. Conclu sion: T he first w eek is the crit ical period of in
vitro developm en t and m atu rat ion of nerve cells from hypo thalam us, and their w ell2developed state
m ain tain s th roughou t the second w eek. T he crit ical techn iques fo r cu ltu re of hypo thalam al nerve cells are
accu rately gain ing the t issue, w ell p reparing the dispersed single2cell su spension, and especially select ing
the p roper adhering substrate.
KEY WORD S Cell cu ltu re N eurons H ypo thalam us In vitro
下丘脑是神经内分泌中心, 它通过与垂体的
密切联系, 调节机体体温、摄食、生殖、水盐平衡等
内分泌活动。我们分别于 1999, 2002 年两次承担
省卫生厅科研课题中, 在关于一氧化氮 (N it ric
ox ide, NO ) 和 一 氧 化 氮 合
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