色谱分析步骤详解.ppt

色谱分析的一般步骤 样品的处理 样品的处理 样品的采集 取样点的选择 样品的收集 样品的运输与储存 样品的处理 固体试样 不均匀试样，应选取不同部位进 行采样，以保证所采试样的代表性。 样品的处理 样品的处理 样品的制备 将样品中预测组分与样品基体和 干扰组分分离、富集和转化成色谱仪 器可分析的形态。 样品的处理 样品的处理 样品的处理 色谱方法选择 色谱分析 色谱分析 采用什么进样装置、色谱柱、检测器？ 采用什么载气？ 采用什么电源装置？ 色谱分析 进样装置 手动进样系统--微量注射器 、固相微萃取进样器 液体自动进样器 阀进样系统 --?液体进样阀、气体进样阀 吹扫捕集系统 热解吸系统 顶空进样系统 热裂解器进样系统 色谱分析 色谱柱参数 色谱分析 气相色谱检测器 1.热导池检测器（TCD） 2. 氢火焰离子化检测器（FID） 3. 电子捕获检测器（ECD） 4. 火焰光度检测器（FPD） 高效液相色谱检测器 1、紫外可见分光光度检测器 2、荧光检测器 3、示差折光检测器 4、二极管阵列检测器 色谱分析 载气 常用的载气有氢气、氮气、氦气等。氢气、氦气的分子量较小常作为填充柱色谱的载气；氮气的分子量较大，常作为毛细管气相色谱的载气；气相色谱质谱用氦气作为载气。 色谱分析 高压电源 （1）0～30 kV 稳定、连续可调的直流电源； （2）具有恒压、恒流、恒功率输出； （3）电场强度程序控制系统； （4）电压稳定性：0.1%；电源极性易转换； 色谱分析 确定初始操作条件 当样品准备好，且仪器配置确定之后，就可开始进行尝试性分离。这时要确定初始分离条件，主要包括进样量、进样口温度、检测器温度、色谱柱温度和流动相流速等。 色谱分析 分离条件优化 分离条件优化目的就是要在最短的分析时间内达到符合要求的分离结果。 如根据实际情况改变柱长、流动相以及其流速、柱温或者更换固定相等来达到更好的分离效果。 色谱分析 定性鉴定 利用保留值及其规律定性 利用纯物对照定性 利用文献值对照定性 利用选择性检测器定性 联用方法定性 化学方法辅助定性 色谱分析 定量分析 归一化法：要求试样中所有n个组分全部流出色谱柱，并全部出峰！ 标准曲线法：准确称取样品m，加入一定量的某纯物质作内标物ms，然后进行色谱分析。根据待测组分和内标物的峰面积及内标物的重量就可求得待测组分的含量。 标准加入法 参考文献 [1]杜斌，郑鹏武.实用现代色谱技术[M].郑州大学出版社，2009 [2]苏立强，郑永杰.色谱分析法[M].北京：清华大学出版社，2009 [3]傅若农.色谱分析概论[M].北京：化学工业出版社，1999 [4]王立，汪正范 . 色谱分析样品处理[M].北京：化学工业出版社，2006 [5]张锦红，刘勇，葛长荣.用色谱分析法建立兽药残留分析方法的基本步骤[J].饲料广角. 2004,12:31-32 [6]气相色谱分析方法的建立步骤..［DB/OL］.中国色谱网/Article/44691-1.shtml . 2008-8-13 化学 1 2 样品的采集 3 样品中各组分 的分离测定 4 数据处理与结果的表达 样品的制备 样品的处理 色谱分析 色谱分析的四个步骤 样品中欲测组分的含量很低?? 原始样品的基体干扰大?? 样品是粘滞的流体、胶体溶液或者固体 需要进行样品处理 液体试样 一般比较均匀，取样单元可较少。 当物料的量较大时，应从不同的位 置和深度分别采样，混合均匀后作 为分析试样。 气体试样 泵：用泵将气体泵入取样容器。 固体吸附剂采样：是让一定量气体通过装有吸附剂颗粒的装置，收集非挥发性物质。 过滤法采样：用于收集气溶胶中的非挥发性组分。 样品的制备 制样程序 破碎——过筛——混匀——缩分（四分法） 先用粗筛，随试样颗粒逐渐减小改用细筛 粗、中、细碎 粗碎 中碎 弃去 粗副样 细碎 过筛混匀缩分 细副样 分析试样 过筛、混匀、缩分 弃去 过筛、混匀、缩分 制样程序 样品处理技术 ??液液萃取 ??液液微萃取 ??固相萃取技术 ??固相微萃取技术 ??膜萃取技术 液体样品 索式提取 ??超声波提取 ??加压溶剂萃取 ??微波提取技术 ??超临界流体 萃取技术 固体样品 专一性 样品 固体 液体 气体 CE TLC SFC HPLC GC 色谱方法 适用对象 气体样品； 挥发性液体 异构体； 化学性质 稳定的样品 液体样品； 热不稳定 的样品； 异构体； 离子性样品 相对分子 质量约 10000的 低聚