DRR036A Takara PCR试剂盒说明书.pdf

Takara Code：DRR036A PrimeScript? RT Master Mix Perfect Real Time （200 次量） 宝生物工程(大连)有限公司 说明书 目 录 内 容 页 码 ● 制品说明 1 ● 制品内容 1 ● 保 存 1 ● 特 长 1 ● RNA 样品制备 1 ● 使用注意 3 ● 操作方法 3 ● 实验例：反转录反应时间和 cDNA 合成量的研讨实验 6 ● 引物设计说明 7 ● 引物设计服务说明 7 ● 制品说明 本制品是 2 Step Real Time RT-PCR用的最佳反转录反应试剂。5×PrimeScript? RT Master Mix中含有定 量RT-PCR的反转录反应所需的所有试剂（PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer），加入模板RNA和水即可迅速进行反应。使用具有较强延伸能力 的PrimeScript? RTase，与以前制品PrimeScript? RT reagent Kit（Perfect Real Time）（Takara Code： DRR037）相同，可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用模板cDNA。 本制品合成的 cDNA 可以用于 SYBR Green 分析法和 TaqMan 探针分析法，可以根据实验目的与 Takara Code：DRR420/DRR820/DRR091/DRR071/DR075/DRR390 等试剂配合使用，能够进行高性能的基因 表达分析。 ● 制品内容（10 μl 反应×200 次） 1. 5×PrimeScript? RT Master Mix（for Real Time）*1 400 μl 2. RNase Free dH2O 1 ml×2 支 3. EASY Dilution（for Real Time PCR）*2 1 ml *1 含有 PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、 反应 Buffer。 *2 制作标准曲线时梯度稀释 cDNA 或 RNA 标准品的稀释液。模板 cDNA 或 RNA 如果用水或 TE Buffer 稀释时，由于受 Microtube 吸附作用等的影响，往往不能准确地进行稀释，导致实验结 果精度降低。使用本制品时，即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释，容易在宽广范围内获 得准确定量的标准曲线。EASY Dilution 也可以单独购买（Takara Code：D9160）。 EASY Dilution 请与本公司 Real Time PCR 试剂组合使用，对于其他公司的同类制品的适用性 本公司尚未进行确认。 ● 保 存： -20℃。 ● 特 长 1． 制品为预先混好的 Premix 形式，只需加入模板 RNA 和水便可以开始反应。 2． 可以在较短时间内高效合成 Real Time PCR 用 cDNA，是进行 2 Step Real Time RT-PCR 反应的最佳 试剂。 3． 使用了 Random 6 mers 和 Oligo dT Primer 2 种反转录引物，可以合成最适的 Real Time PCR 用 cDNA。 4． 制品中附加了标准曲线制作用稀释液 EASY Dilution（for Real Time PCR），将 Total RNA 或 cDNA 稀 释至低浓度时也能够进行准确稀释，容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。 ● RNA 样品制备 本制品是将 RNA 反转录成 cDNA 的专用试剂。RNA 的纯度会影响 cDNA 的合成量，而制备 RNA 的关键 是要抑制细胞中的 RNA 分解酶和防止所用器具及试剂中的 RNA 分解酶的污染。因此，在实验中必须采 取以下措施：戴一次性干净手套；使用 RNA 操作专用实验台；在操作过程中避免讲话等等。通过以上办 法可以防止实验者的汗液、唾液中的 RNA 分解酶的污染。 -1-