ReverTra Ace qPCR RT Kit TOYOBO说明书.pdf

科研用 中文说明书 OSAKA JAPAN TOYOBO CO., LTD. Life Science Department PCR 东洋纺 就 选 ReverTra Ace qPCR RT Kit (Code No.FSQ-101) TSB-029 12-03 目 录 [1] 前言 ...............................................1 [2] 产品内容 ...........................................2 [3] 其他必需品 .........................................3 [4] 使用方法 ..........................................4 [5] 相关操作步骤 ......................................5 [6] 常见问题 ..........................................8 [7] 相关产品 ..........................................9 【注意】 本试剂盒中所含的试剂均为科研用试剂。请勿作为诊断、临床试 剂用。在使用时，请严格遵守实验室的一般注意事项，适当使用保护 用品，安全操作。 【保存】 所有组分请均保存于 -20℃条件下。 1[1] 前言 ReverTra Ace qPCR RT Kit 是基于制作 Realtime PCR 用模板 cDNA 的 目的而开发的高效率且使用简单方便的逆转录反应试剂盒。本产品采用了本公 司高性能逆转录酶 ReverTra Ace 和作为 Realtime PCR 目的片段短链 cDNA 合成的最优化反应成分，能够高效率地合成适用于 Realtime PCR 的 cDNA 模 板。此外，本产品简化了试剂盒的构成并且拥有快速的反应操作的特点，能够 在短时间内简单方便地进行 cDNA 合成。 ※本产品的试剂盒内没有添附 Realtime PCR试剂。关于 Realtime PCR产品，推荐使 用本公司的 Realtime PCR用试剂 Realtime PCR Master Mix系列。（详情请参考 [7] 相关产品的内容）。 ◆本产品特征◆ 1．对应各种不同长度目标片段的高效率逆转录 ReverTra Ace qPCR RT Kit 采用了最适合于 Realtime PCR 用 cDNA 合 成的反应缓冲液，和以最恰当比例混合的 Primer 混合液，对于各种不同长度的 目标片段，不用摸索条件就能够进行高效率的逆转录反应。 2．反应时间短、操作简单方便 ReverTra Ace qPCR RT Kit 只需要 15 分钟的逆转录反应，就能够对各种 长度的目标片段进行高效率的逆转录反应。此外，在 Realtime PCR 的过程中， 会自动清除抑制反应的残留 RNA，无须另外进行 RNase H 处理。 3．提高了与 Realtime PCR 试剂的兼容性 ReverTra Ace qPCR RT Kit 采用了对于 Realtime PCR 反应体系的影响 程度最小的成分，即使在 PCR 反应中添加了最多 20% 液量的逆转录反应液， 也能表现出良好的反应曲线（已通过使用本公司的 Realtime PCR Master Mix 确认）。最适合用于表达量较少的 mRNA 的高灵敏度检测。 2[2]产品内容 ◆本产品包含以下几种试剂，每 10μl 反应体系可使用 200 次。 所有试剂请均保存在 -20℃条件下。 试剂名 保存条件 容量 5×RT Buffer （Reaction Buffer+MgCl2+dNTPs） -20℃ 400μl Enzyme Mix （ReverTra Ace reverse transcriptase +RNase Inhibitor） -20℃ 100μl Primer Mix （Random Primer+Oligo(dT) Primer） -20℃ 100μl Nuclease-free Water -20℃ 1000μl×2 5×RT Buffer 含有反应缓冲液、MgCl2、dNTPs 等 5 倍浓度的逆转录反应液 Buffer。溶 解时，可能会出现白色沉淀，但不影响其品质。请使用振荡器等仪器使其混合 均匀，等完全溶解之后再使用。 Enzyme Mix 含有本公司高性能逆转录酶ReverTra Ace和RNase Inhibitor的混合酶液。 -20℃条件下不会冻结。 Primer Mix 含有 Random Primer 和 Oligo(dT) Primer 的混合引物，以最恰当的比例 混