色谱柱知识详解.pptx

主要内容 凝胶色谱 正相色谱 固定相极性大于流动相极性 流动相是弱极性：如正己烷、石油醚等 固定相是有极性：布满硅羟基的硅胶 极性大的化合物 固定相（极性大） 极性小的化合物 流动相（极性小） 出峰慢 出峰快 根据相似相容原理 反相色谱 流动相极性大于固定相极性 流动相是强极性：如甲醇、水 固定相是若极性：十八烷基键合硅胶柱，也叫C18柱，就是把硅胶上原本的硅羟基变成了一条碳十八的长链。 ？ 1、反相色谱的流动相不再需要烃类、氯仿这些更危险的有机溶剂，使用起来更加简单和安全。 2、而极性强的化合物由于分子间作用力更强，往往沸点不低，不适合用气相分析，更适合用反相液相色谱分析 VS 1、反相色谱的流动相有更多的参数选择：PH、缓冲盐种类、浓度等，能更好地调整分离效果，而正相色谱可调整的流动相参数非常有限 亲水作用色谱HILIC模式 测定糖类？ 糖极性很强 用正相：不能溶解在正己烷等非极性流动相中 用反相：糖和C18没有相互作用，出峰太快，无法分离 近几年关于LCMS的HILIC应用研究非常热门，它使用类似于正相的色谱柱，比如硅胶，和传统反相的流动相，比如乙腈/水 这样的组合即能够溶解样品，又能够保留样品，最终使样品得到很好的分离。 离子对色谱 又叫离子交换色谱 适用：化合物极性特别强，一言不合就电离 原理：可增强离子和固定相的相互作用，使不同的化合物得到分离 凝胶色谱 又叫体积排阻色谱 不管是正相、反相还是离子交换色谱，化合物出峰的情况都是和极性相关的，而凝胶色谱的出峰却只和化合物的大小有关，所以也叫体积排阻色谱。 1、当样品流经凝胶色谱柱时，直径较大的化合物，不易进入凝胶颗粒的微孔中，所以很快出峰。/2、而直径较小的化合物会进入凝胶颗粒的微孔中，并不断的进出和扩散，因此，较晚出峰。 1、当样品流经凝胶色谱柱时，直径较大的化合物，不易进入凝胶颗粒的微孔中，所以很快出峰。/2、而直径较小的化合物会进入凝胶颗粒的微孔中，并不断的进出和扩散，因此，较晚出峰。