树脂法纯化10-羟喜树碱的工艺研究.doc

摘要 本论文以，树脂吸附解喜树碱中试的废液10-羟基喜树碱g X-5树脂,吸附时间1.5小时10-羟基喜树碱吸附量最多，流速5BV/h；解析附：75%乙醇洗脱液最佳，流速5BV/h。 本文用大孔吸附树脂分离纯化喜树果实中抗癌活性成分10-羟基喜树碱的工艺，取得了满意的结果关键词　喜树；10-羟基喜树碱； 目录 摘要 2 目录 3 一、前言 4 （一）喜树概况 4 （二）10-羟基喜树碱的研究现状 4 二、树脂纯化10-羟基喜树碱的工艺研究 5 （一）仪器与材料 5 1、仪器 5 2、材料与试剂 6 （二）检测方法 6 （三）样品溶液的制备 6 （四）树脂的预处理 6 (五) 树脂含水率的确定 6 （六）吸附-解吸附实验 6 1、吸附量和吸附率的测定 6 2、吸附量、吸附率和解析率的计算 6 3、洗脱剂解吸附率的 7 4、pH对吸附能力的影响 7 5、温度对吸附能力的影响 7 6、吸附时间对吸附能力的影响 7 7、树脂用量对吸附能力的影响 7 （七）吸附-解吸附实验 7 （八）结果与讨论 7 1、洗脱剂浓度对解析率的影响 7 2、pH值对吸附能力的影响 8 3、温度对吸附能力的影响 8 4、吸附时间及树脂用量对吸附率的影响 9 （九）吸附-解析附 9 1、X-5树脂的泄漏曲线 9 2、X-5树脂洗脱曲线 10 三、结论 11 参考文献 12 一、前言 （一）喜树概况 喜树（Camptotheca acuminata Decne）,为蓝果树科（Nyssaceae）喜树属（Camptotheca Decne）的落叶乔木，高达20余米，为我国特有植物。19世纪末20世纪初，喜树曾天然分布于长江流域及长江以南诸省，主要生长在低山、丘陵及平原的河流两岸、溪旁、林缘、山坡和稻田边。但喜树一直是毁林开田的砍伐对象，所以喜树的野生种群已相当少见。现在喜树在种植方面已经施行GAP管理方法，使开发与保护相结合、药用与非药用相结合，走一条绿色、科学、可持续发展的道路。喜树最重要的价值是它全身各个部位如种子、叶、花、枝条、树皮、根均含有喜树碱（Camptothecine）和10-羟基喜树碱(10-hydroxycamptothecine),在民间喜树的果实、皮、根、枝和叶均可入药，有抗癌、散结、清热、杀虫的功能[1]。用于食道癌、胃癌、直肠癌、肝癌、膀胱癌、卵巢腺癌、慢性粒细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病、血吸虫病肝脾肿大等。喜树的根部中除含有喜树碱、还含有喜树次碱（Venoterpine）即印度鸭脚树碱、鞣花酸-3，3’，4-三甲醚（3，3’，4-Tri-O-methylellagicacid）及9-谷甾醇，干木中含10-甲氧基喜树碱(10-methoxycamptothecine)和10-羟基喜树碱，果实中除含有喜树碱、10-羟基喜树碱、去氧喜树碱（Deoxy-eamptothecine）、喜树次碱外还含有白桦脂酸（betulicacid）、长春苷内酰胺（vincoside-lactam）等（用现代技术提取抗癌活性成分喜树碱的研究）。世界卫生组织已经把喜树碱衍生物的研究作为抗癌药物的主攻方向之一。自1996年美国FDA批准第一个喜树碱类抗癌新药拓扑替康上市后，伊诺替康、9-氨基喜树碱、10-羟基喜树碱等新药不断问世，成为一大类重要临床用抗肿瘤制剂[2-6]。 （二）10-羟基喜树碱的研究现状 羟基喜树碱（10-羟基喜树碱，10-hydroxycamptothecin,HCPT）,是喜树碱天然衍生物20多种单体中抗癌活性最强的一种。羟基喜树碱化学结构与喜树碱相似，10位碳原子上氢为羟基所取代。羟基喜树碱全称（S）-4，9-dihydroxy-4-ethyl-1H-pyrano[3’,4’,6,7]indolizino[1,2]quinoline-3,14(4H,12H)dione,分子式C20H10N2O5，结构式见图1，分子量为364.36，黄色棱柱状结晶，微溶于甲醇、氯仿、吡啶，不溶于水，溶液具荧光，熔点258-263℃[7]。 羟基喜树碱：R=OH 图1结构式1965年3月，Wall[]等人从喜树树干中首次分离得到喜树碱，研究表明喜树碱临床治疗胃癌、膀胱癌、白血病等恶性肿瘤有一定疗效，但由于喜树碱毒性较大，可以起食欲不振、恶心、呕吐等不良反应，及制成水溶性钠盐后抗癌活性下降等原因，使人们对喜树碱研究一度中止。直到1985年，Hsiang等发现喜树碱可以阻断癌细胞中拓扑异构酶I（TopoisokmeraseiI，Topo I）的合成。由于Topo I在癌细胞中的含量大大高于正常组织，而且在S期癌细胞中活性增大，因此抑制Topo I的药物可以选择性抑制增殖期肿瘤细胞的DNA复制，并且研究还表明，喜树碱是通过与