微生物实验报告选读.pptx

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《食品微生物学实验》 开放性实验项目报告书;一、实验流程图;二、实验目的;三、实验原理;四、实验步骤;(二)材料的预处理: ;3.伊红美蓝培养基 (1)成份:蛋白胨2.5g,乳糖2.5g,磷酸氢二钾0.5g,琼脂5g, 蒸馏水250ml., 2%伊红5ml,美蓝水溶液3.25ml。 (2)制备:先将琼脂加至200ml蒸馏水,加热溶解,后加入磷酸氢二钾及蛋白胨乳糖使之溶解,再调pH=7.2-7.4,再加入伊红,美蓝水溶液, 置于高压灭菌锅内以(115℃)灭菌20min,储存于冷暗处备用。 ;5.乳糖胆盐发酵管(单料) (1)成分 蛋白胨 20g 、猪胆盐(或 牛、羊胆盐) 5g 、乳糖 10g 、0.04%溴甲酚紫水溶液 25mL、 蒸馏水 1 000mL、pH 7.4 (2)制法 将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。 注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。;7.EC肉汤   胰蛋白(月示)或胰酪(月示)20.0g、3号胆盐或混合胆盐 1.5g、乳糖5.0g、磷酸氢二钾(K2HPO4) 4.0g、磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.5g、氯化钠5.0g、蒸馏水1000.0mL   将以上成分溶解于蒸馏水中,分装16mm×150mm试管(管内有倒立的小发酵管),每管8mL。121℃高压灭菌15min,最终pH6.9±0.1。;10.磷酸盐缓冲稀释液   贮存液   磷酸二氢钾(KH2PO4) 34.0g、蒸馏水500mL、1 mol/L氢氧化钠175 mL、   将磷酸二氢钾溶于蒸馏水中,用1 mol/L氢氧化钠约175 mL调至1 mol/L氢氧化钠约175 mL。用蒸馏水加至1000mL贮存于冰箱。;3. 初步发酵,将灭好菌的培养液从试管中取出,将水样注入试管中,向普通试管中注入原样水1ml(2个),10-1ml(2个),10-2ml(2个),蒸馏水1ml(1个),然后向小导管(7个)内注入普通培养基,分别倒置于以上试管中向三倍浓缩试管中注入10ml原样水(2个)。10ml蒸馏水(1个)对照。同样方法取3个小导管注入三倍浓缩培养液中,分别倒置于试管中,以上10支试管送至37摄氏度恒温箱内培养。;(四)大肠菌群检测:;3. 乳糖发酵试验 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度,接种三管。乳糖发酵试验将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发醉管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种三管,置36℃ 士1℃ 温箱内,培养24h士2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。;七、注意事项

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