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超声波辅助提取大豆异黄酮 Mauricio a . Rostagno米格尔帕尔马*,卡梅隆·g·巴罗佐 2003年3月7日收到本论文, 2003年6月24日收到修订版,发表于2003年7月2日 摘要 超声波辅助提取与搅拌萃取在从冷冻、干燥的大豆中提取四异黄酮衍生物（大豆苷、大豆异黄酮、染料木苷高效酰苷）还进行了样品的数量的比例的溶剂的体积和长度的提取时间的优化。2003 Elsevier B.V.保留所有权利。 关键词:超声波辅助提取；提取方式；大豆；异黄酮。 1．绪论 异黄酮是在黄酮类化合物中发现的几种植物衍生物。在大豆中它们以12个主要形式存在: 染料木苷、大豆异黄酮、大豆苷和各自的乙酰基，丙二酸和苷元形式[1]。 令人感兴趣的是，这些化合物由于其生物学效应，包括雌激素和杀真菌毒性的活动。大豆异黄酮已证实可以降低患上乳腺癌，前列腺癌和结肠癌几率，正在研究其防治更年期症状和预防骨质疏松症（见参考文献[ 2 ]的一个评论）。它们也可能是重要的抗氧化剂，因为他们有羟基基团在环羟基和/或B位置，因此能够给自由基的氢。异黄酮的抗氧化活性可能是羟基的数目和位置有关[3，4]。 通常,异黄酮提取使用含水甲醇（Me OH)[5],乙醇(Et OH)或乙腈(Me CN)[7,8]。墨菲[9]等，乙腈和丙酮(Ace)CN,与浓盐酸,室温下通过搅拌萃取2小时。 格里菲斯和克里森[10]比较了80%Me OH和60%Me CN从大豆蛋白酸中提取异黄酮,大豆食品和营养补充剂。他们观察到,相比80%Me OH ，60%Me CN为更高效的萃取溶剂80%Me OH。最近,墨菲等人。[11]评价Me CN,丙酮,Me OH,等,加入53%的水,都可以用来提取12个主要从大豆异黄酮提取物,使用搅拌萃取技术。根据这些作者,四种不同的溶剂在不同提取异黄酮形式呈现不同的功能。通过测试Me CN(47%),一般来说,是最好的萃取溶剂对大豆食品来说。大豆面粉,Me OH(47%)比Me 取得了更高的苷元水平Me CN(47%),和Ace(47%),几乎和Me OH一样CN(47%),但略微降低了总异黄酮浓度。Me OH(47%),在大豆面粉,产生类似的结果对Me OH来说Me CN(47%)、Ace(47%)和Me OH在提取糖甙(47%),但较低的回收率得到丙二酸单酰苷。 寻求更环保的方法和提高生产力,新提取技术已经被开发出来,包括超临界流体萃取[12、13]和超声波辅助提取(UAE)[13、14]。其中,超声波辅助提取法是最便宜的技术和对仪器要求最低。 超声波作用下有机物的提取效率的提高是由于超声波在溶剂中产生的空化现象。空化泡的产生和压缩。压缩引起的压力和温度的增加导致了气泡的崩溃。随着泡沫的破灭，导致“波”通过提高混合溶剂。The Me CN (Scharlau, Barcelona, Spain), Et OH (Panreac, Barcelona, Spain)和Me OH (Merck, Darmstadt, Germany)使用高效液相色谱法。水是由Milli-Q型净水器系统从Milipore(Bedford, MA, USA)取得。异黄酮标准溶液和2,5-二羟基苯甲醛Sigma (圣路易斯,密苏里州,美国)。 2．3 提取大豆异黄酮 进行高强度超声波功率200 W和24 k赫兹(200s模型,Hielscher博士,德国)microtip配备2毫米探头。其超声振动振幅控制器将标称功率的100%。超声波浴360 W(J.P. Selecta,巴塞罗那,西班牙) 也被测试作为一种替代的超声波探头高效液相色谱–紫外分析的提取物在一个水系统由自动进样器进行（717 +），泵控制器（600）、泵（616），和一个光电二极管阵列检测器（996），使用一个RP-18柱（李chrospher 100、5毫米，默克）和梯度的酸化水（0.1%乙酸）（溶剂）和乙腈（0.1%乙酸）（溶剂B）在流速为0.3毫升/分钟的梯度为0 min，10 min，15% B；30% B；20 min，25 min，30% B；100% B；35分钟100%的紫外从200到400 nm吸光度监测。紫外光谱记录，并在254纳米的异黄酮峰面积进行定量。进样体积为10 mL的校准曲线（相关系数）对大豆黄酮、染料木苷、染料木素y=44751x+8805 (r2=0.9980), y=77969x—31141(r2=0.9967) 和 y=79785x—55987 (r 2=0.9952)。 检出限(μg/g) 染料木苷、染料木素和大豆苷元高效液相色谱–质谱ESI质谱在200–600 m/z范围内获得。? 图1