生物条形码金纳米粒子与基于DNA酶的双重信号放大技术通过电化学发光用于蛋白质的超灵敏检测课案.ppt

2016 陈雯婷 2015011062 2016年5月17日 文献汇报 ACS Appl. Mater. Interfaces 2015, 7, 696?703 生物条形码金纳米粒子与基于 DNA 酶的双重信号放大技术通过电化学发光用于蛋白质的超灵敏检测 一、背景介绍 二、实验准备 三、原理 四、结果与讨论 五、结论 生物分子的痕量分析和定量例如DNA、蛋白质和生物活性一样与人类健康密切相关的。然而，生物分子的浓度在疾病诊断和生命的探索过程中的活体通常很低,高灵敏的方法用于这些生物分子的检测仍供不应求。信号放大方法经常应用到DNA生物传感器的制备中，来提高灵敏度。 电化学发光（Electrochemiluminescence,ECL）是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，实际上它包括了电化学和化学发光两个过程。 ECL分析方法的优点：它由电激发，易于控制，操作简单且快速；选择性好，易自动控制，探测灵敏度高，线性范围宽，发光标记物非常稳定，标记物为小分子，可标记抗原、抗体、核苷酸等，且不影响其活性。 一、背景介绍 Preparation of Au NPs. Preparation of CdSeTe@ZnS QDs. Preparation of Biobar-Coded Au NPs-QDs. Procedure for DNAzyme Recycle. Immobilization of Gold Electrode. Preparation of Human Serum Samples. 二、实验准备 三、原理 Scheme 1. Schematic Illustration of the Dual Signal Amplification Strategy-Based ECL Aptasensor for Detection of Thrombin CdSeTe@ZnS QDs Signal DNA cDNA Au NPs Figure S1. Agarose gel electrophoresis analysis: 1, low molecular weight DNA marker; 2, hairpin DNA; 3, Substrate; 4, Hairpin DNA/substrate; 5, Thrombin; 6, Hairpin DNA/thrombin; 7, Hairpin DNA/thrombin/substrate; and 8, Hairpin DNA/thrombin/substrate with Zn 2+ 四、结果与讨论 1.可行性验证及表征 Figure S2. Typical TEM image and UV-vis absorption spectrum of the prepared Au NPs. 15nm 532nm Figure 1. (a) UV?vis absorption spectrum and PL spectrum of the products of CdSeTe@ZnS QDs, size distribution of the CdSeTe@ZnS QDs (inset); (b) HRTEM image of the CdSeTe@ZnS QDs; c, UV? vis extinction spectra of DNA, QDs, DNA-QDs, Au NPs, and Au- DNA-QDs core?satellite; (d) the HRTEM image of a biobar-coded Au NPs-QDs nanoprobe 3.3nm CdSeTe@ZnS QDs 632nm Figure 2. EIS of modified Au electrode at different stages: (a) bare Au electrode; (b) capture DNA/Au electrode; (c) MCH/capture DNA/ Au electrode; (d) fragment of substrate/MCH/capture DNA/Au electrode; and (e) biobar-coded Au NPs-QDs/fragment of substrate/ MCH/capture DNA/Au electrode. The electrolyte for EIS detection was 0.1 M KCl + 2 mM [Fe(CN)6]3? /[Fe(CN)6]4? . 金电极表面修饰不同状态的电化学阻抗图。 由电化学阻抗