详细：选修一微生物的培养与应用解题.ppt

选修一 生物技术实践 微生物：一切肉眼看不见或看不清的微小 生物的总称。 艾滋病病毒 大肠杆菌 酵母菌 草履虫 一、微生物的分离和培养 1.培养基 （1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 氮源 无机盐 PH （2）成分：一般都含有水，碳源、______和_______，还需满足不同微生物生长对_______、特殊营养物质以及氧气的需求。 （3）培养基的种类 一、微生物的分离和培养 1.培养基 （4）配置培养基的方法：计算 称重 融化 _______ _______。 灭菌 倒平板 2.无菌技术 （1）含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污 染的方法。 灼烧灭菌 微生物的接种工具 (接种环、接种针、试管口)或其他金属用具接在火焰的充分燃烧层灼烧 高压蒸汽灭菌100kPa 121℃ 15-30min （通常用于培养基的灭菌） 干热灭菌160－170℃ ；1－2h 能耐高温的需要保持干燥的物品(通常用于玻璃器皿的灭菌) 一、微生物的分离和培养 3.微生物的纯化培养技术 （1）平板划线法： 平板划线法是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 （2）稀释涂布平板法： 稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 4.统计微生物数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板， 在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。 ②缺点：不能区分死菌与活菌。 3.统计微生物数目的方法 (2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ③操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 ②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 二、两种菌株筛选、鉴别的比较 土壤中分解尿素的细菌 分解纤维素的微生物 在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，pH升高，说明细菌能分解尿素 ①选择培养基的成分： ①选择培养基的成分： 刚果红染色法，即刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，培养基出现以纤维素分解菌为中心的透明圈 尿素作为唯一氮源 纤维素作为唯一碳源 ②鉴别方法： ②鉴别方法： 小结 1.在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件，另一方面需要确保无处不在的其他微生物无法混入。请回答下列相关问题： (1)培养基能为培养的微生物提供营养。各种培养基的具体配方不同，但一般都含有__________、________、________、________；另外，培养基还需要满足微生物生长对________、____________、________的要求。 (2)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。对实验操作的空间、操作者的衣着和手，需进行清洁和________(填“消毒”或“灭菌”)；对用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等需进行________(填“消毒”或“灭菌”)。 水 碳源 氮源 无机盐 PH 　氧气 特殊营养物质 消毒 灭菌 (3)微生物接种的方法很多，其核心都是要防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。微生物接种最常用的方法是______________和__________________。 (4)对分离的微生物作进一步的鉴定，常需要借助生物化学的方法。如在以________为唯一氮源的培养基中加入____________，可用来鉴定分解尿素的细菌；在以________为唯一碳源的培养基中加入________，可用来鉴定纤维素分解菌。 平板划线法 稀释涂布平板法 尿素 酚红指示剂 纤维素 刚果红 2.(2014新课标全国理综Ⅱ)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题： (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38