3、2体外受精和早期胚胎培养.ppt

试管动物技术 是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育成早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。 * * * §3.2体外受精和早期胚胎培养 1978年7月25日世界首例试管婴儿 试管婴儿 1978年7月25日，世界首例试管婴儿“路易斯．布朗”在英国诞生，现已成为母亲。 1988年3月10日我国首例试管婴儿诞生 著名妇产科专家张丽珠教授与中国首例试管婴儿 1992年我国首例三胞胎试管婴儿 尝试回答下列问题： 1.试管婴儿技术包括哪些操作步骤？ （体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植） 2.试管婴儿培育和母亲正常怀孕的过程有何异同？ 相同之处：都通过有性生殖产生;都要在母体子宫内发育形成胎儿。 不同之处：受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。 一、从试管牛说起 牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右 公牛产生的精子数目就更多了 伟大设想诞生了 试管动物技术过程： 第一步：体外受精 第二步：胚胎的早期培养 第三步：胚胎移植 精子 卵子 受精卵 早期胚胎 移植 子宫 个体 1982年世界首例试管牛犊问世 实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是 和 的培养。 体外受精 早期胚胎 主要包括 、 和 等几个主要步骤 。 概念：采取雌性动物的 和雄性动物的 ，使其在 受精。 二、体外受精 卵母细胞 精子 体外 卵母细胞的采集 精子的获取 受精 a.如何使雌性动物排出更多的卵子？ b.对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊如何采集卵子？ c.对于大家畜或大型动物如何采集卵子？ d.采集的卵子是否马上可以受精？ 阅读P69、70思考以下问题： 1.卵母细胞的采集和培养 1、卵母细胞的采集和培养 采集方法： ①用促性腺激素处理，从输卵管中冲取卵子。 ②直接从卵巢中采集卵母细胞。 　 采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与精子结合完成受精。 （从废弃卵巢取卵；从活体动物卵巢中取卵） 牛卵巢 B超引导法： 借助超声波探头和屏幕的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫，同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。 活体采集的牛卵母细胞 卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱 培养箱 2、精子细胞的采集和获能 （1）采集方法： 假阴道法、手握法和电刺激法 （2）体外精子获能的方法： 培养法: 化学诱导法: 如：啮齿动物、家兔和猪等 如：牛、羊等 放入人工配制的获能液中 放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中 卵巢 卵母细胞 新鲜或解冻的精液 卵母细胞培养 精子离心处理 MⅠ期卵母细胞 MⅡ期卵母细胞 精子获能处理 获能精子 体外受精 受精卵培养 在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程 3、体外受 精过程 精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。 培养液成分： 有机盐、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等 三、胚胎的早期培养 不同动物胚胎移植时间不同。 牛、羊：桑椹胚或囊胚 阶段 小鼠、家兔：卵裂期或 囊胚阶段 试管婴儿：8-16个 细胞阶段 胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。 * * * 牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右 公牛产生的精子数目就更多了