微生物学-5生长解题.ppt

第五章 微生物的生长 及控制;个体生长——微生物细胞的重量和体积不断增大的过程。 个体繁殖——微生物细胞产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。 群体生长——群体中个体数目和重量的增加。可以用重量、体积、密度或浓度来衡量。 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖;单个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代。;第一节 微生物的纯培养;一、用固体培养基分离纯培养（菌落分离法） 1.平板划线分离法 ; 分区划线（适用于浓度较大的样品） 连续划线（适用于浓度较小的样品）;分段划线和连续划线;2.稀释倒平板法 3.涂布平板法 ;简单易行，但易造成机械损伤;连续稀释,目的是使一支试管中分配不到一个微生物。 适合于优势微生物.;三、单孢子或单细胞分离法 ;四、选择性培养基分离法 ;微生物纯培养分离方法的比较;第二节 微生物生长的测定 ;微生物生长测量方法;一、计数法;血球计数板法;原理：将1cm2×0.1mm的薄层空间划分为400小格，从中均匀分布地选取80或100小格，计数其中的细胞数目，换算成单位体积中的细胞数。;2）比浊法;2 间接法（活菌计数法）1）;2）薄膜过滤计数法;二、重量法;三、生理指标测定法;;第三节 微生物的生长规律 ;分批培养：指微生物在一定容积的培养基中，在特定培养条 件下只完成一个生长循环（最后一次收获）的培 养方法。（封闭系统） 连续培养：指微生物在整个生长时间，以一定的方法（恒浊、 恒化）使微生物持续的以较恒定的生长速率生长  的培养方法。（开放系统）;生长曲线：;生长曲线可分：;其它名称：停滞期、调整期 现象：曲线平行于横轴 特点： 生长速率常数= 0 形态变大 合成代谢活跃 （核糖体、酶类、ATP合成加快） 对不良条件敏感 （如氯化钠、温度、抗生素等） 原因：适应环境，调整代谢;◆菌种 ： 繁殖速度较快的菌种的延迟期一般较短 ◆接种物菌龄 ： 用对数生长期的菌种接种时，其延迟期较短，甚至检查不到延迟期； ◆接种量：一般来说， 接种量增大可缩短甚至消除延迟期（发酵工业上一般采用1/10的接种量）； ◆培养基成分： ◇在营养成分丰富的天然培养基上生长的延滞期比在合成培养基上生长时短； ◇接种后培养基成分有较大变化时，会使延滞期加长，所以发酵工业上尽量使发酵培养基的成分与种子培养基接近。;对实践的指导意义：;2 对数期;应用意义： ①生产上用作接种的最佳菌龄； ②发酵工业上尽量延长该期，以达到较高的菌体密度 ③食品工业上尽量使有害微生物不能进入此期 ④是生理研究或进行染色、形态观察等的良好材料;3 稳定期;应用意义： 发酵生产形成的重要时期（抗生素、氨基酸等），生产上应尽量延长此期，提高产量，措施如下： 补充营养物质（补料） 调pH 调整温度 ;4 衰亡期;二、同步培养 ;同步培养方法 ;硝酸纤维素滤膜法;三、连续培养 ;无菌培养基储备器;(一)恒化连续培养;(二)恒浊连续培养;;;(三)连续发酵与单批发酵相比;第四节 环境因素对微生物的影响 ;影响表现： 影响酶活性 影响细胞膜的流动性 影响物质的溶解度;（一）微生物生长的三个温度基点;根据微生物的最适生长温度的不同，可将微生物划为三个类型：;应用 ;微生物对氧的需要和耐受力在不同的类群中变化很大，根据微生物与氧的关系,可把它们分为几种类群: 专性好氧菌: 好氧菌 微好氧菌： 兼性厌氧菌 耐氧厌氧菌： 厌氧菌 (专性)厌氧菌：;氧浓度对不同微生物生长的影响; 在氧还原为水的过程中，可形成某些有毒的中间产物，例如，过氧化氢（H2O2）、超氧阴离子（ O2· ）等。超氧阴离子为活性氧，兼有分子和离子的性质，反应力极强，极不稳定，可破坏膜和重要生物大分子，对微生物造成毒害或致死。 好氧微生物具有降解这些产物的酶，如过氧化氢酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶等。 而严格厌氧菌缺乏SOD，故易被生物体内极易产生的超氧阴离子自由基毒害致死。;各类菌所含对氧解毒酶;◆影响膜表面电荷的性质及膜的通透性 ◆改变酶活、酶促反应的速率及代谢途径 如：酵母菌在pH4.5-5产乙醇，在 pH6.5以上产甘油、酸。 ◆影响培养基中营养物质的离子化程度;微生物生长的pH值三基点： 各种微生