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『分子生物学』 第一章 分子生物学发展简史 1、中心法则：复制 DNA 复制 RNA 蛋白质（画图+解释） P13有完整的示 意图。 定义：遗传信息从DNA流向RNA再流向蛋白质的规律称为中心法则。 解释：编码蛋白质的基因中所蕴含的信息通过转录和翻译两个相关联的过程得到表达。RNA聚合酶以DNA中的一条链为模板合成互补的一条RNA单链，将DNA中所蕴含的遗传信息以mRNA的形式带到核糖体中，在核糖体中作为多肽链合成的直接模板指导蛋白质的合成。 2、基因工程 实质：基因重组 P5 3、朊病毒，唯一一种蛋白质能够自我复制的病毒。 第二章 遗传物质的本质 1、什么可以作为遗传物质？除了DNA之外，RNA、蛋白质都可以。 2、一些经典的实验，肺炎双球菌实验，噬菌体实验都证明了DNA是主要的遗传物质。 3、RNA作为遗传物质时，病毒的例子：人免疫缺陷病毒（HIV）、非典型肺炎（SARS） 4、RNA有两种复制，一种是一般而言的复制，还有一种是一些病毒的复制，多了逆转录的步骤，如HIV。 5、逆转录酶的发现证明遗传信息不仅可以从DNA流向RNA，也可以从RNA流向DNA。 6、测序方法了解：末端终止法、化学裂解法、全自动测序 7、核酸的二级结构即双螺旋结构的基本要点： （1）DNA分子是由两条反相平行的脱氢核苷酸链盘旋成双螺旋结构 （2）DNA核糖磷酸排列在外侧构成基本骨架，碱基位于内侧 （3）氢键，碱基互补配对原则 8、核酸的三级结构 原核细胞中的超螺旋化，真核细胞中的核小体结构。 重点掌握真核生物核小体。核小体由两个单位的组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成八聚体的核心，约165bp的DNA双螺旋形成两圈超螺旋盘旋在核小体的核心上。在两个核小体之间由1bp-80bp长的连接DNA相连。 9、名词解释 ①核酸的变性：核酸在化学或者物理因素的影响下，维系核酸双螺旋结构的氢键和碱基堆集力受到破坏，分子由稳定的双螺旋结构松懈为无规则线性结构甚至解旋成单链的现象，称为核酸的变性。 ②核酸的复性：变性DNA在适当条件下，两条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象称为复性。 ③核酸的分子杂交技术：指不同来源的核酸分子按照碱基互补配对原则形成稳定的杂交双链分子，是核酸研究中的一项基本实验技术。 ④杂交的本质：在一定条件下使两条具有互补序列的核酸链实现复性，因此可以利用杂交技术检测特定的核酸序列的存在。 第三章 基因、基因组和基因组学 1、掌握关键基因 ①移动基因又称转座基因，由于它可以从染色体基因组上的一个位置转移到另一个位置，甚至在不同染色体之间跃迁，因此也称跳跃基因。 ②断裂基因在编码序列中间插有与氨基酸编码无关的DNA间隔区，这些间隔区称为内含子；而编码区则称为外显子。含有内含子的基因称为不连续基因或断裂基因。 2、基因按其功能主要分为结构基因、调控基因和RNA基因。 3、真核和原核生物的基因结构有何区别 ①真核生物基因一般以单顺反子的形式存在，编码单基因产物。原核生物的基因一般以多顺反子的形式存在，转录产生的mRNA，可同时编码两种甚至数种基因产物。 ②原核生物基因的编码区是连续的，真核生物基因的编码区被非编码区分隔开来。 4、 真核和原核生物的基因结构相同点 原核生物和真核生物的基因都可以分为编码区和非编码区。 5、基因组指整套染色体中的全部基因。 原核基因组：原核细胞内构成染色体的一个DNA分子。 真核基因组：单倍体细胞核内整套染色体所含有的DNA分子 6、染色体功能实现的3个要素（真核生物）：复制起点、着丝粒和端粒。 7、端粒和端粒酶 ①端粒是染色体末端的结构，有助于染色体的稳定，广泛存在于各种生物体中。端粒端粒由一系列短重复序列构成，人的端粒DNA长约10-15kb，由重复的GGGTTA组成。 ②端粒酶是由RNA和蛋白质组成的核糖核蛋白，具有逆转录的性质，可以以特异的内在RNA为模板，合成端粒重复序列，添加到染色体的3’端。 ③端粒与细胞寿命有关，决定细胞的衰老和死亡。肿瘤细胞具有端粒酶活性，使癌细胞获得无限增殖能力。 第四章 DNA的生物合成 1、中心法则内容：（同第一章） 2、DNA的合成：生物体合成DNA的手段有两种： ①、DNA复制，这是DNA为模板合成DNA的过程，它存在于所有的活细胞之中； ②、逆转录，这是以RNA为模板合成DNA的过程，主要存在于逆转录病毒的生活史之中。 3、RNA的逆转录：以RNA为模板合成DNA，典型的逆转录病毒颗粒从外到内。外被上分布表面糖蛋白（SU，主要抗原）和跨膜蛋白（TM，成熟SU的内部跨膜部分）；中间为衣壳，功能保护基因组；最里面是病毒基因组RNA，其上有逆转录酶（RT）、整合酶（IN）、蛋白酶和tRNA引物。 5、DNA的复制特点：①半保留复制 ②半不连续复制