食品中空肠弯曲菌检测---江苏出入境详解.ppt

空肠弯曲菌检测; 一、空肠弯曲菌的分类和特性：;空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni）是从20世纪80 年代起受到国内外广泛重视的人畜共患病菌。 致病性： 人类：急性细菌性肠炎、格林-巴利综合征 （GBS）、食物中毒。 动物：雏鸡腹泻与肝炎；火鸡的肝炎与蓝冠病。犊牛的腹泻；绵羊的腹泻或流产。;空肠弯曲菌的生物学特性;空肠弯曲杆菌的流行病学和临床表现;细菌分布范围 * 该菌分布广泛，已从多种动物中分离出；也发现于食物与饮水中，尤其是畜禽肉及脏器与鲜奶。 * 食用动物中鸡的带菌率为首位，其次为猪。主要分布在活鸡的消化系统中如腺胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、直肠、泄殖腔等。 * 该菌在人或动物的粪便中存活约4周；在被污染的水源中可存活约5周。;;; 根据美国疾病控制与预防中心（USA-CDC）多年的美国食源性病原微生物引起发病人数的统计资料，空肠弯曲菌导致的病例数排名第二。禽肉、生牛奶中的空肠弯曲菌被美国列为重点监测食源性致病菌之一。 32nd CCFH（1999年）提出5组优先评估的“病原-食品”组合,其中包括“禽肉-空肠弯曲菌”。 空肠弯曲菌在许多发达国家也是被报告最普遍的胃肠炎致病菌之一，如：美国、英国、丹麦、芬兰、爱尔兰、荷兰、挪威、瑞典、瑞士等。;二、空肠弯曲菌的检验技术;空肠弯曲菌;设备和材料;三气培养箱（如Binder等 ) ;弯曲菌检验程序;增菌液接种 ; mCCDA平板上所挑取的可疑菌落通常带有金属光泽、扁平、湿润、沿划线生长。 ; CFA显色平板上所挑取的可疑菌落为红色、突起、湿润，菌落较小直径约2～3mm，边缘有一圈红色的透明环，中间有一个圆形的不透明、颜色较深的红色小点的菌落。 ; 将所挑取的3～5个可疑菌接种到不含抗生素的 哥伦比亚血琼脂平板，微需氧条件下42±0.5℃培养24 h-48h后，进行后续的空肠弯曲菌鉴定。 ;空肠弯曲菌的鉴定;快速鉴定;快速鉴定;快速鉴定;快速鉴定;后续鉴定 1. 微需氧条件下25℃生长试验 2. 有氧条件下42±0.5℃生长试验 3. 先锋霉素（头孢霉素）的敏感性检测 （可选） ISO ：奈啶酮酸的敏感性检测 （越来越多的C.jejuni与C.coli的非特异 性菌株出现）;后续鉴定;后续鉴定;后续鉴定;主要弯曲菌的生化特性与鉴定表： 空肠弯曲菌 结肠弯曲菌 海鸥弯曲菌 乌普萨拉弯曲菌. 形态、动力性： 革兰氏阴性，弯曲如小逗点状，两菌体的末端相接时呈S形或 螺 旋状或海鸥展翅状，并呈现螺旋样运动 氧化酶试验： 阳 性 过氧化氢酶试验： ＋ ＋ ＋ — 或微弱 马尿酸盐水解试验： ＋ — — — 吲哚乙酸脂水解试验： ＋ ＋ — ＋ 先锋霉素敏感性： R R R S 微需氧条件25℃生长试验： 不生长 有氧条件42生长试验： 不生长 （注： ＋ 阳性； — 阴性； S 敏感； R 有抗性）;已试用过的弯曲菌生化鉴定与筛选检测的商品化试剂;微生物API鉴定系统; C.2 弯曲菌的筛???检测方法 C.2.1 miniVidas用于弯曲菌的初筛，原理为酶联荧光免疫分析(ELFA)方法。对于结果阴性的可以直接判定为阴性，对于结果阳性的需进一步确认，可比传统方法快2天。（具体参照