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骨髓活检巨核细胞数量与血小板生成素讲述
骨髓活检巨核细胞数量与血小板生成素(TPO)反馈机制的研究
沈阳市红十字会医院
金涛
项目目的
预期实现通过测定外周血TPO浓度估测骨髓巨核细胞增生状况的检测方法
技术路线
科学性及其先进性
TPO及c-mpl受体的结构和功能及表达目前已经研究十分透彻,但对于TPO浓度的反馈调节机制尚不明了
TPO基因表达速率相对恒定
巨核细胞和血小板表面c-mpl受体清除TPO
TPO浓度动态调节的主要机制:c-mpl受体清除环节
在现有多个临床研究中,实验数据未能显现骨髓巨核细胞数量与TPO浓度的足够肯定性的关联
这些实验均为骨穿涂片计数巨核细胞,不能真实反映骨髓内巨核细胞的真实数量
推测:穿刺抽吸标本的稀释程度不确定
用骨髓活检病理切片计数巨核细胞,能够得到真实的巨核细胞数量与血清TPO浓度的关联程度
骨髓活检标本巨核细胞数量定量测定
成熟巨核细胞可由形态确定,不成熟巨核细胞如淋巴样小巨核、单圆核巨核的可靠判定只能依据免疫组化
塑料包埋骨髓活检标本的CD41单抗标记:识别通过形态难以辨认的淋巴样小巨核、单圆核巨核进行标记
巨核细胞分布的不均一性,需要选择按单位面积或骨小梁分区进行计量
临床现状
ITP诊断对骨髓检查的要求
数量增多、成熟障碍
中国ITP诊治共识2016
5、诊断ITP的特殊实验室检查:血小板生成素(TPO)检测可以鉴别血小板生成减少(TPO升高)和血小板破坏增(TPO减少),有助于鉴别ITP与不典型再障/低增生MDS。
临床预期
预期:TPO浓度与骨髓巨核细胞更显著的关联证据
检测外周血来估测骨髓巨核细胞数量
作为血小板减少患者的常规检查项目
工作基础
血液科科系结构完备,包括血液专科门诊、血液病房、骨髓形态实验室(病房)、血液实验室1(1号楼5楼)、血液实验室2(1号楼5楼)、骨髓病理实验室(病房)、PCR实验室(2号楼3楼)、血细胞单采室(病房)、细胞治疗中心实验室(病房)。
骨髓形态实验室能够开展骨髓穿刺检查形态学分析、各种溶血试验、血细胞化学染色。免疫及DIC相关检测。
骨髓病理实验室能够开展血细胞病理免疫组化、骨髓活检塑料病理检查。
PCR实验室能够开展各种白血病融合基因PCR检测、Jak2-V617F基因突变检测等。
血细胞单采室具备第三代血细胞分离机,能够开展红细胞、血小板分离、造血干细胞采集、血浆置换等治疗。
20余年来血液专科作为市级重点科系,已承担完成省市多项科研立项并多次获得科技进步奖。
工作基础
科室设有的骨髓病理实验室已独立开展20年骨髓病理检查,具备全套实验仪器。
作为市级血液病重点专科,能够提供充裕的合法的实验样本。
资金使用方案
科技三项费用
项 目
金 额(万元)
费 用 说 明
仪器设备费
1
ELISA检测仪
实验材料费
8
试剂
科研业务费
其 他
1
技术交流、文本印刷
合 计
10
资金使用方案
申请科研项目经费10万元。
设备购置明细:国产ELISA检测仪(分光光度计)一台,单价1万元,合计1万元。
TPO检测试剂盒:2,500.00元/套,共20套合计5.00万元用于检测TPO浓度。
骨髓活检塑料包埋试剂盒:1,000.00元/套,共20套合计2.00万元用于骨髓塑料包埋
骨髓小巨核酶标试剂盒:4,000.00元/套,共5套合计1.00万元用于巨核细胞免疫组化
参加国内学术会议1次,地点待定,参会人员2名,会议时间3天,会议标准1,000.00/人*天,共需0.60万元,主要内容为与项目相关的骨髓病理组化技术学术交流。
期末发表专业论文2篇,每篇版面费用0.20万元共0.40万元,用于项目结果的总结发布。
谢谢
2016/12/9
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