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6 金黄色葡萄球菌检验PPT - PowerPoint Presentation
一、生物学特性——菌体形态及培养特征;大多数菌株产生类胡罗卜素,使细胞团呈现出深橙色到浅黄色,色素的产生取决于生长的条件,故称金黄色葡萄球菌。;大多数菌株最适生长温度30-37℃,最适pH为7.0-7.5;
兼性厌氧菌,在好氧条件下生长最好;
可在15%氯化钠和40%胆汁中生长。
一般用含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉汤增菌或7.5%氯化钠肉汤增菌。; 所有的毒株产生血浆凝固酶,人和动物来源的菌株通常可凝固兔、人、马和猪的血浆。
金黄色葡萄球菌产生磷脂酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶等,大多数菌株可水解天然的动物蛋白并释放脂肪酸。在BP平板产生磷脂环。;生物学特性 ——致 病 性; 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,临床表现多种多样,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。 ;葡萄球菌皮肤感染; 葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病,可引发不同程度的急性胃肠炎症状,恶心、呕吐最为突出而且普遍,腹痛、腹泻次之。
当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品,如牛奶和奶制品、肉、蛋等,在温度条件适宜时,经8-10小时即可相当数量的肠毒素。;二、检验程序与操作方法;检样
25g(ml)+225ml灭菌生理盐水;检验程序 ——增菌培养;检验程序 ——分离培养;大而突起,圆形,不透明,表面光滑,有溶血环;血平板制作;BP(贝尔德- 帕克)平板:
胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和矿物元素
丙酮酸钠是一种生长促进剂
亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有毒性,并使菌落产生黑色
卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环
甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用。; 在BP平板上典型菌落为:灰色到黑玉色,圆形,光滑突起,湿润,直径2-3mm,边缘常为淡色(米黄色或灰色),周围为一混浊带,在其外缘常有一透明圈。用接种针接触菌落似有黄油树胶的粘稠感。
长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落,其黑色常较典型菌落淡些,且外观可能粗燥,质地较干燥。 ;B-P平板;革兰氏阳性,球形,组成葡萄状;检验程序 ——鉴定之凝固酶试验;试管法;阳性反应;有凝块; 兔血浆制备
成分:柠檬酸钠0.106 mol/L
(31.3g Na3C6H5O7·2H2O溶于1L蒸馏水中)
制法:一份加兔血9份混合后离心2000rpm,10min吸取上清液即为兔血浆。;葡萄糖肉浸液肉汤的制备;25g样品+ 225ml 生理盐水 ;25g样品+ 225ml 生理盐水 ;第一天 器材准备、样品处理、增菌培养和BP平板分离接种;第二天 接种选择性平板进行分离培养和玻片法血浆凝固酶试验
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