刘慧慧浙江海洋学院分子生物学复习资料.docVIP

第一章 绪论 Molecular Biology是研究核酸、蛋白质等生物分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学，是人类从分子水平上真正揭示生物世界的奥秘，由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。 DNA recombination （genetic engineering、DNA重组）：将不同DNA片段（如某个基因或基因的一部分）按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。 Enumerate the first evidence that DNA is hereditary substance? 1) 肺炎球菌的转化实验 2）噬菌体感染实验 第二章 DNA semiconservative replication(DNA半保留复制) 每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，该复制方式称为DNA半保留复制。 SSB protein ：该蛋白可以在远低于解链温度时使双链分开，并牢牢地结合在单链DNA上，即SSB蛋白的作用是保证被解链酶解开的单链在复制完成前能保持单链结构，它以四聚体形式存在与复制叉处，待单链复制后才掉下，重新循环。 转座（DNA transposition）：是由可移动因子介导的遗传物质重排现象。 转座子（transposon Tn）：是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 复合式转座子（composite transposon）：是一类带有某些抗药性基因（或其他宿主基因）的转座子，其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列。 在DNA复制中起作用的酶： 拓扑异构酶Ⅰ、解链酶、引发酶、SSB蛋白 从基因组结构来看，原核细胞DNA有如下特点(Prokaryotes DNA features)： 1. 结构简练:原核DNA分子的绝大部分是用来编码蛋白质的，只有非常小的一部分不转录 2. 存在转录单元:原核生物DNA序列中功能相关的RNA和蛋白质基因，往往丛集在基因组的一个或几个特定部位，形成功能单位或转录单元，它们可被一起转录为含多个mRNA的分子，叫多顺反子RNA。 3. 有重叠基因：同一段DNA能携带两种不同的蛋白质的信息，包括以下几种情况： (1)一个基因完全在另一个基因里面;2）部分重叠;（3）两个基因只有一个碱基对的重叠 组蛋白特征: ( Histone features) （1）进化上极端保守，不同种生物组蛋白的氨基酸组成十分相似，尤其是H3、H4； （2）无组织特异性 （3）肽链上氨基酸分布不对称，碱性氨基酸集中分布在N端的半条链上，疏水基团分布在C端； （4）组蛋白发生修饰，包括甲基化、乙酰化、磷酸化及ATP核糖基化等； （5）具有富含赖氨酸的组蛋白H5，存在于鸟类、鱼类及两栖类的红细胞中，H5还富含丙氨酸、丝氨酸及精氨酸。 DNA组成染色体的主要过程：(how does DNA assemble into chromosome?) 核小体的形成：在核小体中DNA盘绕组蛋白八聚体体核心，从而使分子收缩成1/7。 由10nm的染色质细丝盘绕成30nm的螺旋管状粗丝（称螺旋管）。螺旋管的每一螺旋包含6个核小体，其压缩比为6； 螺旋管可进一步压缩形成超螺旋，压缩比为40 超螺旋圆筒进一步压缩1/5便成为染色体单体。 真核生物与原核生物DNA复制的区别（Prokaryotes and eukaryotes DNA duplicate difference）： 它们都是半保留和半连续复制，复制过程都有引发、延长和终止三个阶段，都必须有相应功能的蛋白质（如SSB）和DNA聚合酶参与等等。 不同之处： 1）真核的每条染色体有多个复制起始位点，每个起始位点大约有20kbp,而原核只有一个起始位点。真核细胞的不同复制单元不是同时启动的，起始位点受到时相控制。 2）复制速度：真核生物10-100bp/s;原核生物：1500bp/s;真核生物的复制时间大约需要6-8h，E.coli需要40min； 3）真核生物有大得多的染色体。DNA的复制是由G1期决定的，细胞的DNA加倍是在S期进行的。 4）真核染色体在全部复制完成之前，各个起始位点上的复制不能开始新的复制，受到一种复制的控制。而原核的起始位点可以连续地开始新的复制事件，表现为一个复制子上有多个复制叉存在。 5）引物酶 6）酶和辅助因子不同 7）双向复制 转位因子的结构特点，转座子的遗传学效应（Transposition factor the characteristic of structure, the transposon tagging of genetics effect）： 1）在转位因子的两端，存在末端重复序列（T